Développement d'un immunocapteur impédimétrique pour la détection et la quantification d'une sous-population cellulaire : application au diagnostic précoce des infections
Auteur / Autrice : | Armelle Montrose |
Direction : | Karine Reybier |
Type : | Thèse de doctorat |
Discipline(s) : | Chimie, biologie, santé |
Date : | Soutenance en 2013 |
Etablissement(s) : | Toulouse 3 |
Mots clés
Résumé
La technologie des biocapteurs et des dispositifs de type laboratoire sur puce est devenue un outil essentiel pour le diagnostic rapide et le suivi de traitement de maladies. Le travail de ce mémoire s'intègre dans un projet de recherche visant à la conception d'un laboratoire sur puce pour l'isolement, le tri et la quantification de sous populations cellulaires pour le diagnostic précoce et en temps réel des maladies infectieuses. L'objectif du travail de thèse est de développer un immunocapteur impédimétrique pour la détection des monocytes inflammatoires dont l'augmentation témoigne d'un processus infectieux. La fonctionnalisation permettant le piégeage des cellules via une liaison antigène/anticorps a dans un premier temps été optimisée sur des électrodes d'or fabriquées à partir des techniques issues des microtechnologies. Le greffage des anticorps repose sur un système multicouche comprenant des monocouches auto-assemblées et des protéines d'adhésion, chaque étape du protocole ayant été caractérisée par des méthodes électrochimiques et optiques pour différentes tailles d'électrodes. Les performances du biocapteur ont ensuite été étudiées par spectroscopie d'impédance électrochimique et ont mis en évidence une détection sélective suivant l'anticorps immobilisé et quantitative des monocytes piégés. Afin d'augmenter la sensibilité de détection, des systèmes de microélectrodes ont alors été développés. Après optimisation du procédé de fabrication et de modification des électrodes, la détection des monocytes a été validée par spectroscopie d'impédance. L'intégration des microélectrodes dans un dispositif microfluidique est en cours de validation.