Développement de biocapteurs ampérométriques à base de tyrosinase pour la détection de composés phénoliques dans des matrices agroalimentaires : thé et huile d'olive

Development of tyrosinase amperometric biosensors for detection of phenolic compounds in food matrices : tea and olive oil

• Auteur / Autrice : Saloua Nadifiyine
• Direction : Jean-Louis Marty
• Type : Thèse de doctorat
• Discipline(s) : Chimie
• Date : Soutenance en 2013
• Etablissement(s) : Perpignan
• Ecole(s) doctorale(s) : École doctorale Énergie environnement (Perpignan ; 1999-....)

Mots clés

Mots clés contrôlés

Phénols

Capteurs (technologie)

Résumé

Dans ce travail de thèse, nous avons développé deux biocapteurs ampérométriques à base d’enzyme tyrosinase commerciale et un troisième à base de tyrosinase semi purifiée extraite au sein de notre laboratoire. Ces biocapteurs ont montré de très bonnes performances analytiques envers différents substrats phénoliques, avec des détections de l’ordre du nanomolaire. L’estimation du taux de phénols (composés dotés d’un pouvoir antioxydant élevé) dans des échantillons réels, a présenté de très bonnes corrélations; d’une part avec la méthode chromatographique HPLC pour des échantillons de thé et d’autre part avec la méthode colorimétrique de Folin-Ciocalteu pour des échantillons d’huiles d’olive. Une étude comparative entre les réponses de trois enzymes (tyrosinase, peroxydase et laccase) aux phénols, a révélé la capacité du biocapteur à tyrosinase à réagir avec la quasi-totalité des phénols présents dans les échantillons d’huile d’olive. Ces résultats nous ont permis de montrer la fiabilité de nos biocapteurs à tyrosinase commerciale et de diminuer le coût des analyses effectuées avec la tyrosinase semi purifiée.

In this thesis, we developed two amperometric biosensors based on commercially available tyrosinase and a third one, based on a semi purified tyrosinase, extracted in our laboratory. These biosensors showed excellent analytical performances to various phenolic substrates at nanomolar level. Phenol rate was estimated in real samples. Excellent correlations were obtained with the HPLC chromatographic method for tea samples and with Folin-Ciocalteu colorimetric method for olive oil samples. The comparative response study of the three enzymes (tyrosinase, peroxidase and laccase) to phenols showed the ability of the tyrosinase biosensor to react with the whole phenols presents in olive oil samples. These results have allowed us, to show the reliability of our developed biosensors and to reduce the analysis cost established with the semi purified tyrosinase biosensor.