Etude de l'initiation des réponses immunitaires innées et adaptatives par les cellules dendritiques plasmacytoïdes

Study of the initiation of innate and adaptive immune responses by plasmacytoid dendritic cells

• Auteur / Autrice : Camille Guillerey
• Direction : Gilles Dadaglio
• Type : Thèse de doctorat
• Discipline(s) : Immunologie B3MI
• Date : Soutenance en 2013
• Etablissement(s) : Paris 7

Mots clés

Mots clés contrôlés

Espèces réactives de l'oxygène

Cross-priming

Inflammation

Immunité innée

Cellules tueuses naturelles

Cellules dendritiques

Résumé

Les cellules dendritiques plasmacytoïdes (pDC) sont connues pour leur capacité à sécréter d'importantes quantités d'interférons de type I. Nous avons généré un nouveau modèle murin dépourvu de pDC : les souris IK L/L Rag -/-. Ce modèle est basé sur une mutation hypomorphique du gène Ikaros sur un fond Rag2 KO, conduisant à l'absence de pDC, de lymphocytes B et T. En utilisant les souris IK L/L Rag -/-, nous avons établi que les pDC sont essentielles pour l'induction d'une activité NK en réponse à une stimulation par le CpG, un agoniste de TLR-9. Nous avons également démontré que les pDC sont critiques pour la production systémique de chimiokines participant au recrutement de cellules innées en réponse à une stimulation TLR-9. De plus, l'injection de splénocytes de souris C57BL/6 préalablement déplétés en pDC aux souris IK L/L Rag -/- reconstitue les compartiments lymphoïdes B et T, permettant ainsi l'utilisation des souris IK L/L Rag -/- pour l'étude des réponses adaptatives en absence de pDC. Enfin, la dernière partie de cette thèse a porté sur les mécanismes induits par l'activation et permettant la présentation croisée d'antigènes par les pDC. Nous avons démontré d'une part, qu'une stimulation par un ligand de TLR-7 permet la protection des antigènes internalisés en régulant le pH phagosomal des pDC et d'autre part, que les espèces réactives de l'oxygène participent à l'augmentation de l'expression des molécules de co-stimulation et à l'activation des lymphocytes T par les pDC. L'ensemble de ces résultats contribue à l'avancée des connaissances concernant le rôle des pDC dans l'immunité innée et des mécanismes par lesquels elles induisent une réponse adaptative.

Plasmacytoid dendritic cells (pDCs) are well known for their ability to secrete huge amounts of type I interferons. We generated a new mouse model lacking pDCs : the IK L/L Rag -/- mice. This model is based on an hypomorphic mutation of the Ikaros gene on a Rag 2 deficient background, leading to the absence of pDCs, B and T cells. Using the IK L/L Rag -/- mice, we established that pDCs are essential for NK cell responses to a TLR-9 stimulation by CpG. We also demonstrated that pDCs are crucial for the systemic production of chemokines required for innate cell recruitment following TLR-9 triggering. Moreover, by injecting pDC-depleted splenocytes to IK L/L Rag -/- mice, we were able to reconstitute both B and T cell compartments. Thus, these mice can be used to study adaptive immune responses in the absence of pDCs. Finally, we studied the activation- induced mechanisms that allow antigen cross-presentation by pDCs. Finally, we studied the activation-induced mechanisms that allow antigen cross-presentation by pDCs. We showed that a TLR-7 stimulation allows the protection of internalized antigens by regulating pDC phagosomal pH. In addition, we found that reactive oxygen species participate to the up-regulation of co--stimulatory molecule and to T cell activation by pDCs. Altogether, these results contribute to a better understanding of how pDCs initiate innate and adaptive immune responses.