Validation préclinique d'immunothérapie anti-leucémique par vaccination ADN

• Auteur / Autrice : Carole Le Pogam
• Direction : Rose Anne Padua
• Type : Thèse de doctorat
• Discipline(s) : Biologie des cellules sanguines
• Date : Soutenance en 2013
• Etablissement(s) : Paris 7

Mots clés

Mots clés contrôlés

Leucémie aigüe myéloïde

Modèles animaux de maladie humaine

Syndromes myélodysplasiques

ADN

Vaccination

Immunothérapie

Résumé

Nous avons montré dans un modèle murin de LAP, qu'une immunothérapie associant un vaccin ADN à I'ATRA permet de prolonger la survie et d'éradiquer les cellules leucémiques en stimulant-une réponse immune anti-leucémique spécifique. Cependant, malgré une rémission moléculaire complète dans le sang et la moelle osseuse, des réservoirs extramedullaires de cellules leucémiques subsistent. Afin de tester l'efficacité de cette approche thérapeutique dans d'autres modèles, nous avons développé 2 modèles murins d'initiation et de progression leucémique de SMD et de LAM post-SMD, basés sur l'expression et la coopération physique et fonctionnelle de 2 gènes humains, NRASD12 et BCL-2, et confirmé la pertinence de ces modèles. L'utilisation dans ces modèles, d'un nouveau vaccin, pVAXlFlipper, ne contenant aucune séquence antigénique spécifique, entraine une prolongation de la survie des souris traitées corrélée à une réduction significative de la maladie résiduelle dans le modèle LAP, une stabilisation de la population cellulaire Mac-1h'/Gr-1b° contenant les progéniteurs myéloïdes dans le modèle SMD, et une augmentation de la production d'IFNy et du taux de lymphocytes T mémoires CD4+/CD44h7CD62LI° dans les deux cas. La séquence inédite «Flipper» contient des séquences riches en CG, notamment 2 séquences CpG, menant à l'activation du système immunitaire via les voies de signalisation TLR9 et NFKB, ainsi que des cadres de lecture codant pour 3 peptides aux propriétés immunogéniques. Cette capacité de pVAXlFlipper à amplifier de façon non spécifique une réponse anti-tumorale basique ouvre des perspectives intéressantes sur son éventuelle efficàcité dans d'autres pathologies malignes.

We have shown in a mouse model of APL, that an immunotherapy strategy combining a DNA vaccine with ATRA can prolong survival of treated mice and eradicate leukemic tells by stimulating a specific anti-leukemic immune response. However, despite a cpmplete molecular remission in blood and bone marrow, extramedullary leukemic tell reservoirs remain. To test the efficacy of this therapeutic approach in other models, we have developed two models of murine leukemia initiation and progression of MDS and AML post-MDS, based on the expression and the physical and functional cooperation of two human genes NRASD12 and BCL-2, and confirmed the relevance of these models in patients. The use, in these models, of a new vaccine pVAXlFlipper containing no specific antigenic sequence, led to an extended lifespan of treated mice correlated with a significant reduction of residual disease in the LAP mode', population stabilization Mac-lh7Gr-li° population containing myeloid progenitors in the MDS model, and an increased production of IFNy and an increased level of the CD4/CD44h1/CD62LI° T tells in both cases. The unique sequence ''Flipper'' contains GC-rich sequences, including two CpG sequences, leading to the activation of the immune system through the TLR9 and NFKB signaling pathways, and open reading frames coding for three peptides with immunogenic properties. This ability of pVAXlFlipper to amplify in a non-specific manner a basic anti-tumor response opens interesting perspectives on its potential efficacy in other malignancies.