Etablissement d'un nouveau modèle murin d'accident vasculaire cérébral : l'amaurose transitoire chez la souris

Establishment of a new murin stroke model : amaurosis fugax to the mouse

• Auteur / Autrice : Dominique Lelong
• Direction : Christine Chomienne-Thomas
• Type : Thèse de doctorat
• Discipline(s) : Biologie et pharmacologie de l'hémostase
• Date : Soutenance en 2012
• Etablissement(s) : Paris 7

Mots clés

Mots clés contrôlés

Modèles animaux de maladie humaine

Accident vasculaire cérébral

Rétinopathies

Ischémie

Amaurose fugace

Résumé

L'objectif de ce travail a été de caractériser un nouveau modèle murin d'ischémie rétinienne reproduisant la physiopathologie de l’amaurose transitoire. L'amaurose est une urgence thérapeutique dont la prise en charge est l'objet de nombreuses controverses. Son médiocre pronostic si elle n'est pas rapidement réversible, la difficulté à conduire des études cliniques prospectives randomisées, et les limitations des modèles animaux existants font de l'établissement de nouveaux modèles précliniques d'ischémie rétinienne une priorité pour la recherche dans cette pathologie. Chez la souris, nous avons établi par l'observation de rétines montées à plat après injection systémique de fluorescéine, que la ligature de l'artère ptérygopalatine, couplée à la section de l'artère carotidienne externe homolatérale permettait d'interrompre la circulation sanguine rétinienne ipsilatérale. Le retrait de la ligature s'accompagne de la reperfusion de la rétine. Quatre semaines après un épisode ischémique de 30 min, des altérations fonctionnelles significatives quantitativement mesurables par électrorétinographie contrastent avec une histologie conservée. Une étude préliminaire en qRT-PCR de l'expression de quelques gènes-clés de la cascade ischémique a eu pour objectif de fournir des repères temporels utiles à la conception ultérieure de nouveaux protocoles thérapeutiques. Ce modèle d'amaurose transitoire purement vasculaire, simple, réversible, reproductible, utilisable chez le rat comme chez la souris, s'ajoute aux modèles murins d'accidents vasculaires cérébraux ischémiques disponibles et peut aussi être adapté de façon à modéliser diverses situations cliniques d'ischémie rétinienne.

This study aims to characterize a new murin model of retinal ischemia, reproducing amaurosis fugax physiopathology. Amaurosis is a therapeutic emergency but its acute treatment remains controversial. Its poor prognosis when it is not quickly reversible, the difficulty to conduct decisive randomized prospective clinical trials, and the limitations of the existing animal models, makes the establishment of a new retinal ischemia preclinical model a priority for the field. We established, for the mouse, by observation of flat-mounted retinas after fluorescein systemic injection that the ligature of the pterygopalatin artery, coupled with the section of the homolateral external carotid artery interrupts the ipsilateral retinal blood circulation. Ligature's withdrawal comes along with retina reperfusion. Four weeks after a 30 min ischemic episode, significant functional changes quantitatively measurable by electroretinography contrast with a preserved histology. A preliminary qRT-PCR study of some ischemic key genes expression had for purpose to supply temporal biomarkers useful for the later design of therapeutic protocols. This purely vascular amaurosis fugax model is simple, reversible, reproducible, usable to the rat as to the mouse. It comes to complete the already available murin stroke models and can be also adapted to modelize diverse clinical situations of retinal ischemia.