Rôle de la protéine kinase dépendante de l'AMPc (PKA) dans les étapes précoces du cycle réplicatif du VIH-1

Involvement of cAMP dependent protein kinase (PKA) in the early steps of HIV-1 replication cycle

• Auteur / Autrice : Charline Giroud
• Direction : Laurence Briant, Nathalie Levy-Chazal
• Type : Thèse de doctorat
• Discipline(s) : Biochimie et Biologie Moléculaire
• Date : Soutenance le 06/04/2012
• Etablissement(s) : Montpellier 1
• Ecole(s) doctorale(s) : Sciences Chimiques et Biologiques pour la Santé (Montpellier ; Ecole Doctorale ; ....-2014)
• Partenaire(s) de recherche : Laboratoire : Centre d'études d'agents Pathogènes et Biotechnologies pour la Santé (Montpellier)
• Jury : Président / Présidente : Michel Segondy
• Jury : Examinateurs / Examinatrices : Nathalie Levy-Chazal
• Jury : Rapporteur / Rapporteuse : Stéphane Basmaciogullari, Jean-Christophe Paillart

Mots clés

Mots clés contrôlés

Protéines kinases

Cellules -- Interaction

Protéines virales

VIH (virus)

Mots clés libres

Vih-1

Capside

Trafic intracellulaire

Cytosquelette

Pka

Kinase

Hiv-1

Capsid

Pka

Intracellular traffic

Kinase

Cytoskeleton

Résumé

Les étapes précoces du cycle réplicatif du VIH-1 sont assistées par des cofacteurs cellulaires dont la nature et la fonction restent mal connues. Nos travaux ont caractérisé la contribution de la protéine kinase dépendante de l'AMP cyclique (PKA), dans la cellule cible ou incorporée dans la particule virale VIH-1, dans les étapes post-entrée du cycle réplicatif. Les virus dépourvus d'activité PKA se caractérisent par un défaut de la synthèse de l'ADN proviral. En absence de Nef, la perte d'activité PKA associée aux particules VIH-1 induit une baisse plus modérée du pouvoir infectieux. En outre, le contournement des voies d'entrée classiques, par l'utilisation de particules pseudotypées, rend l'infectiosité indépendante de l'activité PKA. L'action de PKA s'exercerait donc au sein de la particule VIH-1 assemblée et impliquerait à la fois la protéine Nef et les voies de transport des complexes de transcription inverse au cours des étapes post-entrée. De plus, l'inhibition de l'activité PKA dans les cellules cibles entraîne également un défaut de synthèse de l'ADN proviral. Nos résultats indiquent que PKA agit comme un cofacteur de la transcription inverse.

The nature and function of cellular factors involved in post-entry steps of the HIV-1 life cycle are still poorly understood. We highlighted the role of cAMP-dependent protein kinase (PKA) in the early step of viral cycle, either as a host cellular protein in infected cells or as an incorporated protein into HIV-1 particles. PKA-deficient viruses failed to synthesize proviral DNA. In the absence of Nef, the loss of PKA activity associated to HIV-1 particles induces a minor diminution of infectiousness. Accordingly, VSV-G pseudotyped viruses, that use alternate entry pathway, exhibit full infectivity regardless of PKA deficiency. PKA action could therefore take place in the assembled HIV-1 particles, implying Nef protein and intracellular pathways of reverse transcription complexes. Moreover, the inhibition of PKA activity in target cells engenders a defective proviral DNA synthesis. Taken together, our data suggest that PKA may act as a cofactor required for HIV-1 reverse transcription.