Impact des protéines de la famille Bcl-2 dans l'induction de l'apoptose par les agents anti-microtubules.

Impact of Bcl-2 proteins in induction of apoptosis mediated by microtubules targeting agents

• Auteur / Autrice : Amandine Savry
• Direction : Diane Braguer, Véronique Bourgarel-Rey, Rodrigue Rossignol, Cristiano Ferlini
• Type : Thèse de doctorat
• Discipline(s) : Sciences de la vie et de la sante
• Date : Soutenance le 06/12/2012
• Etablissement(s) : Aix-Marseille
• Ecole(s) doctorale(s) : École Doctorale Sciences de la Vie et de la Santé (Marseille)
• Partenaire(s) de recherche : Equipe de recherche : Centre de recherche en Oncologie biologique et Onco-pharmacologie (Marseille)
• Jury : Examinateurs / Examinatrices : Diane Braguer, Véronique Bourgarel-Rey, Olivier Micheau

Mots clés

Mots clés contrôlés

Vinorelbine

Anticancéreux

Mots clés libres

Tubuline

Mitochondrie

Cancer

Bcl-2

Bim

Paclitaxel, sensibilité

Tubulin

Mitochondria

Cancer

Bcl-2

Bim

Paclitaxel

Sensitivity

Résumé

Les agents anti-microtubules (MTAs), comme les taxanes et les vinca-alcaloïdes, sont des anticancéreux largement utilisés en pratique clinique. Ils agissent d'une part en perturbant les fonctions du réseau microtubulaire, conduisant à un arrêt du cycle cellulaire. D'autre part, à côté de cet effet anti-prolifératif, les MTAs sont capables d'induire divers signaux responsables de l'exécution du programme apoptotique via la voie mitochondriale intrinsèque. La famille Bcl-2 joue un rôle primordial dans l'induction de l'apoptose par ces agents. Aussi, au cours de ce travail, nous nous sommes d'abord intéressés à l'origine de la diminution de Bcl-2 lors de l'apoptose médiée par la vinorelbine. Nous avons ainsi mis en évidence la régulation transcriptionnelle de bcl-2 grâce à l'identification d'un nouveau site de liaison de p53 sur le promoteur de bcl-2. Dans un second temps, nous avons évalué l'influence de la famille Bcl-2 dans la réponse aux MTAs. En effet, nous nous sommes focalisés sur la sensibilité paradoxale aux MTAs de certaines tumeurs surexprimant Bcl-2, in vitro et in vivo chez la souris nude. Nous avons montré l'implication de Bim dans cette augmentation de sensibilité, qui agit en perturbant le réseau mitochondrial. Enfin, nous avons investigué le mécanisme moléculaire liant la surexpression de Bcl-2 et celle de Bim. Nous avons montré que la surexpression de Bcl-2, en inhibant l'activité transcriptionnelle de p53, permettait une meilleure activité du facteur de transcription FoxO3a, principal acteur de la régulation génique de Bim.

Microtubule targeting agents (MTAs), such as taxanes and vinca-alkaloïds, are anticancer drugs widely used in clinical practice. Firstly, they are known to disturb functions of microtubular network, leading to cell cycle arrest. On the other hand, beside this anti-proliferative effect, MTAs are able to trigger signaling cascades leading to apoptosis execution, through intrinsic mitochondrial pathway. Bcl-2 family proteins play a crucial role in induction of MTAs-induced apoptosis. In this work, we first studied the origin of Bcl-2 downregulation in vinorelbine-mediated apoptosis. We thus highlighted a transcriptional mechanism through the identification of a novel p53 binding site in the bcl-2 promoter. Second, we evaluated the influence of Bcl-2 family in response to MTAs. Indeed, we focused on paradoxical sensitivity to MTAs of some tumors overexpressing Bcl-2, in vitro and in vivo in nude mouse. Bim was involved in this enhanced sensitivity, by disrupting the mitochondrial network. We then investigated the molecular mechanism linking Bcl-2 and Bim overexpressions. We showed that Bcl-2 overexpression, by inhibiting the transcriptional activity of p53, leads to an increase in activity of the transcription factor FoxO3a, the main actor in Bim transcriptional regulation. Our work underlines the importance of Bcl-2 family and especially Bim as potential biomarker in predicting MTA's efficacy.