Etudes fonctionnelles de gènes impliqués dans la différenciation gonadique précoce chez la souris : Foxl2/Rspo1 et SRY/sry

Functional studies of genes involved in early gonadal differentiation in mice : Foxl2/Rspol and SRY/sry

• Auteur / Autrice : Aurélie Auguste
• Direction : Eric Pailhoux
• Type : Thèse de doctorat
• Discipline(s) : Génétique cellulaire et moléculaire
• Date : Soutenance en 2011
• Etablissement(s) : Versailles-St Quentin en Yvelines

Mots clés

Mots clés contrôlés

Différenciation sexuelle

Facteur de transcription SOX-9

Gène sry

Génétique moléculaire

Souris

Gonades

Mots clés libres

Foxl2

Rspo1

Résumé

Chez les vertébrés, avant la différenciation sexuelle, les futures gonades sont bipotentielles. Chez le mâle, la présence du gène SRY induit la différenciation testiculaire. En absence de celui-ci, ou si sa protéine est non fonctionnelle, des ovaires se forment. Ce travail traite de la différenciation sexuelle précoce et se divise en deux parties traitant respectivement de la voie femelle et mâle. La première partie de cette thèse traite de la différenciation ovarienne précoce. Cette étude se focalise sur le rôle de deux gènes femelles : Foxl2 et Rspondin-1 (Rspo1). Les souris XX Foxl2-/- sont infertiles, quant aux Rspo1-/-, elles développent des ovo-testicules. L’étude des gonades de souris XX Foxl2-/-/Rspo1-/- démontre une masculinisation des gonades ainsi que du tractus. Ceci serait dû à la présence ectopique de cellules stéroïdogènes fœtales. Nos résultats tendent à conclure que Foxl2 et Rspo1, par deux voies de signalisation distinctes, qui réprimeraient la voie mâle, via entre autre, l’inhibition de la stéroïdogénèse fœtale. La seconde partie traite de différenciation testiculaire et plus particulièrement de la caractérisation de lignées de souris transgéniques pour SRY caprin (SRYg). Chez les mammifères, SRY est exprimé lors de la différenciation sexuelle, jusqu’à l’âge adulte, sauf chez la souris où il s’éteint rapidement. Il existe un site de fixation de la protéine SOX9 sur le promoteur SRY, absent chez la souris, qui active l’expression de SRY in vitro. Grâce à l’étude de nouvelles lignées de souris transgéniques pour SRYg, dont le site SOX9 a été muté, nos résultats démontrent que ce site n’est pas le seul responsable de l’expression continue du gène SRYg.

In vertebrates, before sexual differentiation, future gonads are bipotential. In males, presence of the testis-determining factor, SRY gene, induces testis differentiation. In its absence or if SRY protein is not functional, ovaries are formed. This work is about early sexual differentiation and is divided into two parts dealing with female or male pathway. The first part is about early ovarian differentiation. This study focuses on the role of two genes, Foxl2 and Rspondin-1 (Rspo1). In XX mice, invalidation of Foxl2 and Rspo1 lead respectively to infertility and ovo-testis formation. Our results show masculinization of XX Foxl2-/-/Rspo1-/- gonads in mice, apparently du to the presence of ectopic steroidogenic fetal cells. Our results tend to conclude that Foxl2 and Rspo1 belong to two distinct signalling pathways that suppress testicular differentiation, via for example, inhibition of fetal steroidogenesis in female. The second part is about testicular differentiation and especially characterization of transgenic mouse lines for SRY goat (SRYg). In mammals, SRY gene is expressed during sexual differentiation, until adulthood, except in mice where expression rapidly switches off. A SOX9 binding site localised on SRY promoter has been described as inducing SRY gene expression in vitro. Thanks to new SRYg transgenic mouse lines studies, whose SOX9 binding site was deleted, our results do not demonstrate any crucial regulatory effect of this binding site on SRYg expression. Therefore, this SOX9 binding site is not responsible alone for continuous expression of the gene SRYg.