Etude moléculaire des étapes précoces de la thymopoïése humaine. Caractérisation fonctionnelle des protéines AF1q et TMEM131L

Molecular study of early satges of human thymopoiesis. Fonctional characterization of proteins and AFlq TM EM131L

• Auteur / Autrice : Nesrine Maharzi
• Direction : Bruno Canque
• Type : Thèse de doctorat
• Discipline(s) : Biologie des cellules sanguines
• Date : Soutenance en 2011
• Etablissement(s) : Paris 7
• Jury : Président / Présidente : Antoine Toubert
• Jury : Examinateurs / Examinatrices : Bruno Canque, Antoine Toubert, Elizabeth Macintyre, Christine Perret, Evelyne Lauret, Bernard Mignotte
• Jury : Rapporteurs / Rapporteuses : Evelyne Lauret, Bernard Mignotte

Mots clés

Mots clés contrôlés

Voie de signalisation Wnt

Récepteurs Notch

métabolisme

Lymphocytes B

cytologie

Lymphocytes T

Mots clés libres

Af1q

Tmem131-l

Préthymocytes

Résumé

Le but de mon projet de thèse a été d'étudier la fonction des deux protéines AF1q (ALL-Fused gene from chromosome l) et TMEM131-L au cours du développement précoce des lymphocytes T humains. Les travaux antérieurs du laboratoire ont permis l'identification des préthymocytes humains foetaux et soulever ainsi la question des mécanismes moléculaires contrôlant leur émergence extra-thymique ainsi que les modalités de leur polarisation vers le lignage T. Dans ce contexte une étude de recherche de gènes candidats a permis de sélectionner 2 gènes sur la base de leur profil d'expression du le stade des préthymocytes aux étapes précoces du développement intrathymique. Des stratégies de surexpression et d'invalidation par interférence ARN pour l'abord de l'étude fonctionnelle de ces deux gènes. Ainsi, la protéine AF1q a été caractérisée comme une protéine nucléaire qui promeut l'engagement vers le développement de lymphocyte T en restreignant les autres potentiels lymphoïdes. Elle correspond à un nouveau régulateur de l'engagement vers le lignage T ciblant spécifiquement le compartiment hématopoïétique précoce en agissant en synergie avec le signal Notch. Le deuxième gène TMEM131-L jusqu'à lors jamais étudié a constitué la majeur partie de mon travail de thèse. Nous avons dans un premier temps abordé son profil d'expression au niveau transcriptionnel et protéique ainsi que sa distribution subcellulaire dans des lignées lymphoïdes et les différentes sous populations intratymiques. Le gène est fortement exprimé dans les thymocytes immatures CD3- et compte au moins quarte isoformes protéiques. L'analyse de sa dynamique d'expression au cours du développement intrathymique a révélé une translocation à la membrane de la protéine au moment de la beta sélection ainsi qu'une colocalisation avec l'axine impliqué dans la voie Wnt. Une étude exploratrice exhaustive a permis de caractériser la protéine TMEM131-L comme un nouvel inhibiteur proximal de cette voie de signalisation. L'analyse du profil d'expression du TMEM131-L dans des LAL T et B a permis sa caractérisation comme un gène supresseur de tumeur potentiel.