Caractérisation de l'expression et du rôle de Bclaf1 au cours de la différenciation des progéniteurs de la rétine des vertébrés

Caracterization of Bclaf1 expression and biological function during differenciation of retinal progenitors

• Auteur / Autrice : Laura Picault
• Direction : Olivier Goureau
• Type : Thèse de doctorat
• Discipline(s) : Neurosciences
• Date : Soutenance en 2011
• Etablissement(s) : Paris 6

Mots clés

Mots clés contrôlés

Cellules ganglionnaires de la rétine

Électroporation

Cellules -- Prolifération

Différenciation cellulaire

Résumé

La différenciation des progéniteurs rétiniens se fait sous le contrôle de facteurs endogènes et exogènes. Dans le but d’identifier des gènes régulant le développement rétinien, notre équipe avait analysé le programme transcriptionnel des progéniteurs d’une part au cours du développement normal de la rétine et d'autre part dans des conditions où la formation des photorécepteurs est profondément altérée. Cette approche a permis de révéler plusieurs facteurs candidats dont Bclaf1 (Bcl-2 associated transcription factor), décrit comme un inducteur potentiel de la mort cellulaire et un répresseur général de la transcription et identifié dans des complexes ribonucléoprotéiques. L’analyse immunohistochimique de son profil d’expression spatio-temporel montre que Bclaf1 est exprimé dans les progéniteurs rétiniens précoces et les précurseurs post-mitotiques exprimant le facteur de transcription Pax6, puis son expression se restreint aux cellules ganglionnaires et dans les cellules amacrines (CAs) et horizontales (CHs). L’invalidation génétique de ce facteur in vivo (souris Bclaf1 KO) et in vitro (électroporation shRNA sur explants de rétines) mène, aux stades précoces (E14-E16), à une réduction importante du nombre de progéniteurs mitotiques, de précurseurs post-mitotiques et de CAs et CHs. En parallèle une augmentation du nombre de photorécepteurs (PRs) est observée en absence de Bclaf1. La surexpression de Bclaf1 dans les progéniteurs rétiniens tardifs (P0) n’est pas suffisante pour générer des CAs et des CHs, mais entraine une diminution du nombre de PRs. Nous avons proposé un modèle dans lequel Bclaf1 serait nécessaire mais pas suffisant pour le maintien des progéniteurs rétiniens précoces dans le cycle cellulaire et pour leur différenciation en CAs et CHs. Dans ce contexte, l’extinction de son expression permettrait la transition des progéniteurs rétiniens vers un état de compétence dit tardif afin de produire les PRs et les cellules bipolaires et gliales de Müller. L’utilisation de mutants fonctionnels de Bclaf1 nous a permis d’éclaircir les mécanismes moléculaires qui sous-tendent ses effets sur les progéniteurs rétiniens. Nous avons montré que le domaine nécessaire à son interaction avec Bcl-2 n’était pas requis mais que la partie N-terminale de Bclaf1 (portant un domaine riche en RS ainsi qu’un motif de type bZIP) était responsable des effets observés. La capacité de Bclaf1 à favoriser l’activité transcriptionnelle de Pax6 via son domaine bZIP pourrait être un des mécanismes mis en jeu en plus d’une implication dans la régulation de la biogenèse des ARN, via son domaine riche en arginine et sérine (RS), dans les effets biologiques de Bclaf1