Auteur / Autrice : | Mathieu Gaudin |
Direction : | Olivier Laprévote |
Type : | Thèse de doctorat |
Discipline(s) : | Chimie analytique |
Date : | Soutenance en 2011 |
Etablissement(s) : | Paris 5 |
Partenaire(s) de recherche : | autre partenaire : Université Paris Descartes. Faculté de pharmacie de Paris (....-2019) |
Mots clés
Résumé
Ces travaux de thèse ont visé à approfondir nos connaissances sur l’implication des lipides dans la neurodégénérescence et la maladie d’Alzheimer. Afin de parvenir à cet objectif, des développements méthodologiques préalables en chimie analytiques ont été nécessaires de manière à procéder à l’analyse la plus exhaustive possible du lipidome de différents organismes. Une étude fondamentale a été menée afin d’évaluer l’apport de la photoionisation à pression atmosphérique (APPI) à l’analyse par spectrométrie de masse d’une large gamme de lipides. La méthode développée en APPI a été appliquée à l’étude de cultures cellulaires de Leishmania donovani. Trois approches analytiques présentant des degrés de sélectivité différents et utilisant un large panel de méthodologies de couplage entre la chromatographie liquide à ultra-haute performance et la spectrométrie de masse ont également été développées. Une méthode globale d’analyse sans a priori a été mise en œuvre afin d’obtenir une empreinte lipidique de l’échantillon par spectrométrie de masse à haute résolution. Des informations plus détaillées peuvent être obtenues en ayant recours aux cinq méthodes semi-globales développées qui exploitent la sélectivité procurée par la spectrométrie de masse en tandem. Enfin, trois méthodes d’analyse ciblées visant à quantifier des espèces d’intérêt majeur pour notre problématique biologique ont été optimisées. Ce large panel de méthodes d’analyse lipidomique a été utilisé pour révéler à l’aide d’outils statistiques multivariés les altérations de la composition lipidique de différents types d’échantillons murins et humains.