MITF contrôle la voie de réponse de dommage à l'ADN et la sénescence des cellules de mélanome

MITF controls the DNA damage response signaling pathway and cellular senescence in melanoma cells

• Auteur / Autrice : Sandy Giuliano
• Direction : Corine Bertolotto
• Type : Thèse de doctorat
• Discipline(s) : Interactions cellulaires et moléculaires
• Date : Soutenance en 2011
• Etablissement(s) : Nice
• Ecole(s) doctorale(s) : École doctorale Sciences de la vie et de la santé (Nice ; 1992-....)

Mots clés

Mots clés contrôlés

ADN -- Altération

Vieillissement

Cellules

Protéines p53

Facteur de transcription Brn-2

Mélanome

Résumé

Le mélanome métastatique est une tumeur hautement agressive contre laquelle il n’existe aucun traitement efficace. MITF, dont l’isoforme M est restreint au lignage mélanocytaire, est un facteur de transcription qui joue un rôle important dans la tumorigenèse du mélanome. Dans ce contexte, j’ai montré que l’invalidation de MITF par la technique de l’interférence à l’ARN (siRNA spécifiques de MITF) entraîne la mise en place d’un programme de sénescence caractérisé par des changements morphologiques et biochimiques et un arrêt soutenu de la prolifération des cellules du mélanome. De plus, j’ai montré que l’invalidation de MITF engage une voie de réponse de dommages à l’ADN impliquant l’activation des kinases ATM, CHK2 et l’augmentation de p53, qui sont essentiels à la mise en place du programme de sénescence. Parallèlement à ces résultats, l’examen des noyaux cellulaires, par marquage au DAPI des cellules de mélanome invalidées pour MITF, révèle la présence de défauts de ségrégation de chromosome. Les données de la littérature indiquent que ces défauts sont associés aux dommages à l’ADN et qu’ils pourraient conduire à l’entrée en sénescence. Afin d’identifier les cibles de MITF impliquées dans ces défauts, les interactions entre MITF et le génome (ChIP-séquence) et le séquençage haut-débit des ARN de cellules invalidées pour MITF versus des cellules contrôles (RNA-séquence) ont été étudiées et montrent que plusieurs gènes impliqués dans la réplication, la réparation de l’ADN et la mitose sont régulées directement ou indirectement par MITF. Parmi les gènes identifiés, se trouve la survivine, une protéine augmentée dans de nombreuses tumeurs, impliquée à la fois dans le contrôle de la karyokinèse et de la cytokinèse. Mes résultats confirment que la survivine est régulée par MITF. De plus, l’invalidation de la survivine entraîne des défauts de ségrégation de chromosome et un programme de sénescence cellulaire de manière comparable aux cellules invalidées pour MITF. Ces résultats montrent que MITF agit comme un facteur anti-sénescence et favorise la prolifération en contrôlant des gènes de la division cellulaire comme la survivine, qui pourrait ainsi constituer une cible potentielle dans le traitement du mélanome.