Approches cellulaires et moléculaires de deux vibrioses chez l'huître Crassostrea gigas et la palourde Ruditapes philippinarum
Auteur / Autrice : | Mohamed Houmed Aboubaker |
Direction : | Jean-Louis Nicolas, Christine Paillard |
Type : | Thèse de doctorat |
Discipline(s) : | Microbiologie |
Date : | Soutenance en 2011 |
Etablissement(s) : | Brest |
Mots clés
Mots clés contrôlés
Résumé
L'objectif de cette thèse était d’étudier et de comparer le comportement de deux vibrions pathogènes impliqués dans deux vibrioses, Vibrio aestuarianus chez l’huître, Crassostrea gigas et Vibrio tapetis chez la palourde, Ruditapes philippinarum. Pour cela, des souches des deux vibrions ont été transformées par un plasmide portant les gènes de la "Green Fluorescent Protein" et celui d’une résistance à un antibiotique. Cet outil a permis un suivi temporel chez des huîtres infectées par balnéation par deux souches de V. Aestuarianus GFP, l’une pathogène (02/041), l’autre (01/308) plus modérément pathogène et une souche de V. Tapetis-GFP. La vitesse de pénétration dans l’hémolymphe est souche-dépendante. La souche 02/041 s’est avérée particulièrement efficace pour entrer dans son hôte, suivie de la souche 01/308. Ils pouvaient être détectés dès une heure après leur distribution. V. Tapetis s’introduisait plus lentement mais se maintenant plus longtemps. L’étape suivante de l’infection étant la confrontation des vibrions aux défenses immunitaires des bivalves, les relations vibrions hémocytes ont été examinées précisément. A cette fin, une méthode utilisant des anticorps souche-spécifique a été développée. Contrairement aux billes de latex fluorescentes, cette méthode a permis de quantifier in vitro au cytométrie de flux, les nombres de V. Tapetis phagocytés et de ceux restant sur la membrane externe aussi bien avec des hémocyanines adhérents que décollés. La piste des exo polysaccharides (EPS) secréte��s par les bactéries a été explorée pour savoir s’ils pouvaient favoriser ou empêcher la phagocytose. V. Tapetis produit des EPS en abondance, contrairement à V. A.