Synthèse et étude d’outils moléculaires pour la protéomique

Synthesis and studies of molecular tool-box for proteomic

• Auteur / Autrice : Ghyslain Budin
• Direction : Charles Mioskowski, Alain Wagner
• Type : Thèse de doctorat
• Discipline(s) : Chimie organique
• Date : Soutenance en 2010
• Etablissement(s) : Strasbourg

Mots clés

Mots clés contrôlés

Staudinger, Hermann (1881-1965)

PCR (génétique)

Azobenzène

Protéines -- Analyse

Imagerie

Protéomique

Mots clés libres

Réaction click

Ligation de Staudinger

Réactions bioorthogonales

Résumé

L’objectif majeur de ce travail a été de développer une boite à outil moléculaire permettant la visualisation des protéines dans la cellule et leur identification par spectrométrie de masse. Ces outils ont été conçus pour réagir de façon bioorthogonale avec des sondes chimiques ciblant une classe spécifique de protéine. Le premier objectif a été de développer une approche de marquage fluorescent des protéines en conditions non-covalentes et non-dénaturantes puis de développer un système pour la purification de complexe protéique en conditions non-dénaturantes pour identifier les sous-unités protéiques.

The general topic of this work was to develop new chemicals and biochemical tools box allowing proteinsvisualization in cells and identification of proteins by mass spectrometry. These tools were designed to react bioorthogonally with chemicals probes that target a specific class of protein. The first objective was to develop a non-covalent and non-denaturing fluorescent labeling approach of proteins then to develop a system for protein complex purification in non-denaturing conditions in order to identify multisubunit protein complex and functional activity.