Monolithe polymérique ou à base de silice pour la préconcentration couplée à l'électrophorèse capillaire pour l'analyse de biomolécules

• Auteur / Autrice : Airong Feng
• Direction : Myriam Taverna
• Type : Thèse de doctorat
• Discipline(s) : Pharmacie
• Date : Soutenance en 2010
• Etablissement(s) : Paris 11
• Partenaire(s) de recherche : autre partenaire : Université de Paris-Sud. Faculté de pharmacie (Châtenay-Malabry, Hauts-de-Seine)

Mots clés

Mots clés libres

Monolithe

Dna

Electrophorèse capillaire

Résumé

L’électrophorèse capillaire (EC) est une technique analytique séparative moderne qui offre les avantages d’une haute résolution, de temps d’analyse courts et d’une consommation minimale des échantillons et réactifs. Toutefois, il est difficile d'analyser ces échantillons directement par EC sans prétraitement. Par conséquent, la purification des échantillons et l'amélioration de la sensibilité de détection sont primordiales afin de permettre l’utilisation de l’EC pour analyser ces composés. Ainsi, le but de ce travail était de développer et de synthétiser in-situ des monolithes dans des capillaires pour la pré-concentration de protéines et d’ADN en EC. Le couplage en ligne de l'extraction et la séparation d'ADN par EC a été développé en préparant un monolithe aminé à base de silice. Par ailleurs, la polymérisation d'un monolithe fonctionnalisé par des anticorps immobilisés a été mise au point pour une pré-concentration de protéines par immuno-affinité couplée à leur séparation par EC.

Capillary electrophoresis (CE) is increasingly important for biomolecular analysis with the advantages of high resolution, short separation time, minimal sample and reagent requirement. However, because of the complexity of real biological sample in which matrices (e. G. , salts, lipids) interfere with the injection and assay, it remains difficult to analyze biological sample directly by CE without pretreatment. Moreover, in the case of low concentration levels of analytes in real samples, CE is limited by its detection sensitivity. The in situ prepared monolithic materials, which have the advantages of easy preparation, excellent permeability, were proposed for the preconcentration purpose in CE. In this thesis, an amino silica monolith was developed for efficient DNA extraction and in-line coupling with CE for DNA separation. In addition, the polymerization and application of an affinity polymer monolithic capillary for immunopreconcentration-CE of protein were included in this work