Développement et validation de méthodes reposant sur l'électrophorèse capillaire pour le contrôle qualité de protéines thérapeutiques : de l'albumine humaine issue du fractionnement plasmatique à l'interleukine-7 humaine recombinante

Development and validation of methods based on capillary electrophoresis for quality control of therapeutic proteins: from human albumin obtained by plasmatic fractionation to recombinant human interleukine-7

• Auteur / Autrice : Youssef Alahmad
• Direction : Myriam Taverna
• Type : Thèse de doctorat
• Discipline(s) : Biotechnologie. Chimie analytique
• Date : Soutenance en 2010
• Etablissement(s) : Paris 11
• Partenaire(s) de recherche : Autre partenaire : Université de Paris-Sud. Faculté de pharmacie (Châtenay-Malabry, Hauts-de-Seine)

Mots clés

Mots clés contrôlés

Qualité -- Contrôle

Médicaments protéiques

Sérum-albumine

Interleukines

Glycosylation

Électrophorèse capillaire

Résumé

Les protéines thérapeutiques constituent une partie très importante des biomédicaments. Les protéines sont sujettes à des modifications structurales dues à une variété de mécanismes de dégradation. De plus, une protéine peut subir des modifications post-traductionnelles induisant une hétérogénéité structurale et fonctionnelle. Ainsi, le développement de méthodes analytiques capables de distinguer des formes structurellement très proches est nécessaire pour le contrôle qualité (CQ) de ces biomolécules. C’est donc dans ce contexte que l’électrophorèse capillaire (EC) s’implante progressivement dans les industries (bio)pharmaceutiques. Le but de cette thèse était de développer des méthodes séparatives reposant sur l’EC pour deux protéines d’intérêt thérapeutique, l’albumine du sérum humain et l’interleukine-7 humaine recombinante (rhIL-7). Ces méthodes doivent être capables de séparer et quantifier les différentes variants de l’albumine, ou les différentes glycoformes de rhIL- 7.

Therapeutic proteins are an important class of biopharmaceuticals. Proteins are prone to structural modifications due to a variety of degradation mechanisms. In addition, a protein may undergo during its biosynthesis numerous posttranslational modifications that induce a significant functional and structural heterogeneity. Thus, development of analytical methods able to distinguish similar structurally (related) forms must be implemented for the quality control (QC) of these biomolecules. In this context, a dramatic expands of capillary electrophoresis (CE) is observed in the biopharmaceutical industries. The aim of this thesis, focused on two therapeutic proteins, human serum albumin (HSA) from plasma fractionation and recombinant human interleukin-7 (rhIL-7, a glycoprotein), was to develop CE-based separation methods. These methods should be powerful and able to separate and quantify degraded forms of HSA, or rhIL-7 glycoforms for batch to batch consistency assessment.