Identification des facteurs amibiens impliqués dans la mise en place de la mort cellulaire lors de l'infection hépatique par Entamoeba histolytica

Identification of amoebic factors involved in the host cell death during hepatic infection by entamoeba histolytica

• Auteur / Autrice : Jacques Marquay Markiewicz
• Direction : Nancy Guillén, Daniela Faust
• Type : Thèse de doctorat
• Discipline(s) : Microbiologie
• Date : Soutenance en 2010
• Etablissement(s) : Paris 7

Mots clés

Mots clés contrôlés

Virulence

Mort cellulaire

ultrastructure

Interactions hôte-parasite

Abcès amibien du foie

génétique

Infection à Entamoeba

Entamoeba histolytica

Résumé

Lors d'une amibiase hépatique, avant de pénétrer le parenchyme hépatique, les trophozoïtes de Entamoeba histolytica sont au contact des cellules endothéliales des sinusoïdes hépatiques (LSEC). Notre objectif a été d'identifier les réponses des cellules endothéliales et les facteurs amibiens impliqués dans le processus de la mort de ces cellules pendant les phases précoces de l'amibiase hépatique. En utilisant des cultures de LSEC d'origine humaines, nous avons montré que E. Histolytica induisait la rétraction, l'apoptose et la mort des cellules endothéliales. Par analyse du transcriptome des LSEC, nous avons déterminé que la voie des intégrines avait été modulée spécifiquement par les trophozoïtes virulents. En présence des amibes, le réseau des câbles de stress d'actine et des composants des points d'adhésion focale formés sous contrôle de l'activité des intégrines ont été modifiées. Ces changements dans l'état d'adhésion des LSEC pourraient être un événement clef dans la cascade menant à la mort cellulaire induite par E. Histolytica. Les facteurs amibiens responsables de ces phénomènes ont été étudiés à partir des protéines des amas lipido-protéiques de l'uropode relargués dans le milieu extracellulaire et permettant une défense immunitaire de l'amibe. Une analyse en protéomique de composants de l'uropode a montré l'abondance de certains facteurs comme la lectine Gal/GalNAc et des cystéines protéases dont nous avons montré l'implication dans l'adhérence, la rétraction et la mort des LSEC. Les facteurs amibiens contribuant à la rétraction et la mort des cellules auraient un effet important sur l'inflammation et par conséquent sur le développement des abcès du foie.

During hepatic amoebiasis, before entering the liver parenchyma, trophozoites of Entamoeba histolytica are in contact with liver sinusoïdal endothelial cells (LSEC). Our objective was to identify the responses of endothelial cells and amoebic factors involved in the process of cell death during the early steps of hepatic amoebiasis. Using cultures of human LSEC, we have shown that E. Histolytica induced retraction, apoptosis and death of endothelial cells. By analysis of the human transcriptome, we have determined that the integrin pathway was modulated specifically by virulent trophozoites. In the presence of amoebae, the network of actin stress fibers and components of focal adhesion formed under control of the activity of integrins have been modified. These changes in the state of LSEC adhesion could be a key event in the cascade leading to cell death induced by E. Histolytica. The amoebic factors responsible for these phenomena have been studied from proteins of lipid-protein clusters of uropod released into the extracellular environment which allows E. Histolytica to escape from the immune response. A proteomic analysis of uropod components showed the abundance of factors such as the Gal/GalNAc lectin and cysteine proteases which we have shown the involvement in adhesion, reduction and death of LSEC. Amoebic factors contributing to the retraction and cell death could have a significant effect on inflammation and consequently on the development of liver abscess.