Identification de nouvelles cibles pour l'induction de la différenciation des cellules de Leucémies Aigües Promyélocytaires : interconnexions entre la signalisation du G-CSF et de l'acide rétinoïque dans un modèle de résistance à l'acide rétinoïque

Identification of new differentiation targets in Acute Promyelocytic Leukemia cells : Crosstalks between G-CSF and retinoic pathways in a retinoic acid resistance mode

• Auteur / Autrice : Fabien Zassadowski
• Direction : Christine Chomienne-Thomas
• Type : Thèse de doctorat
• Discipline(s) : Biologie des cellules sanguines
• Date : Soutenance en 2010
• Etablissement(s) : Paris 7

Mots clés

Mots clés contrôlés

usage thérapeutique

Récidive

Rétinoïdes

Régulation de l'expression des gènes dans la leucémie

Différenciation cellulaire

Leucémie aiguë promyélocytaire

Résumé

Certains patients atteints de leucémies aiguës promyélocytaires (LAP) développent une résistance à l'ATRA rendant le traitement classique inefficace en cas de rechute. L'établissement de marqueurs prédictifs moléculaires ou cytologiques ainsi qu'une connaissance plus approfondie des mécanismes de régulation transcriptionnelle des gènes cibles de l'acide rétinoïque s'avère donc nécessaire afin d'adapter les stratégies thérapeutiques alternatives. L'étude sur le suivi de la maladie résiduelle de 223 patients atteints de LAP nous a permis de déterminer des seuils, définis sur les valeurs de nombre de copies normalisé du transcrit PML-RARa, ayant une valeur prédictive du risque de rechute. De plus, en regroupant des test de différenciation in vitro de cellules de patients LAP au diagnostic et une analyse statistique du taux de rechutes nous avons établi un lien entre la présence de ÇA, une baisse de sensibilité à l'ATRA, le sous-type BCRl et le risque de rechute, alors qu'aucune corrélation de ce type n'avait été décrite jusqu'à présent. Enfin, nous avons utilisé un modèle cellulaire de résistance à l'ATRA afin de mettre en évidence le rôle de la voie de signalisation MEK-ERK1/2 dans la restauration de la fonctionnalité du complexe transcriptionnel des récepteurs de l'acide rétinoïque impliqués dans la différenciation granulocytaire. L'activation de la voie MEK-ERK1/2 par la combinaison ATRA/G-CSF permet le recrutement des facteurs de transcription RARα et CBP/P300 ainsi que Facétylation des histones H3/H4 au niveau des gènes cibles de l'ATRA. Ce mécanisme représente une nouvelle cible potentielle pour améliorer la thérapie différenciatrice des LAP.

Resistance to all-trans retinoic acid (ATRA) rarely occurs in primary acute promyelocytic leukemias, but some patients can develop ATRA résistance that prevent the use of classical treatment in case of relapse. In order to adapt therapeutical alternatives, it is important to define the risk of relapse for these patients. Thus, it appears necessary to establish molecular and cytological predictive markers of relapse and to increase our understanding of retinoic acid target genes at the transcriptionnal level. Our study on the follow up of APL patient residual disease in 223 APL patients, allowed us to determine thresholds, defined by normalized copies number (NCN) for the BCRl APL subtype, which provide a predictive value for the risk of relapse. When we analysed in vitro differenciation tests. Furthermore, our study identified a pronostic value of a cytology marker of the APL blasts at diagnosis. Indeed, on patients samples, we found a correlation between the presence of Auer Rods in the cytoplasma of the APL blasts with the in vitro differentiation of the blasts with ATRA, the BCRl PML-RAR subtype and the number of relapses. Finally, using an APL cell line with low sensitivity to ATRA we demonstrate a role of the MEK-ERK1/2 signalling pathway at the transcriptional level of the RAR nuclear complex in granulocytic differentiation. The combination of ATRA and G-CSF enhances the recrutement of the RARa receptor, its coactivator CBP/P3QO and the acetylation of histones H3 and H4 at the promoter of RA target genes. This novel mechanism represent a new target to improve differentiation efficacy in APL.