Thèse soutenue

Étude des modifications des protéines induites par la fumée de cigarette
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Auteur / Autrice : Pauline Le Faouder
Direction : Christian RolandoCaroline Tokarski
Type : Thèse de doctorat
Discipline(s) : Molécules et matière condensée
Date : Soutenance le 29/10/2010
Etablissement(s) : Lille 1
Ecole(s) doctorale(s) : École doctorale Sciences de la matière, du rayonnement et de l'environnement (Villeneuve d'Ascq, Nord)

Résumé

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La fumée de cigarette, reconnue comme étant carcinogène, est un aérosol complexe composé de plusieurs milliers de substances chimiques susceptibles de réagir avec les biomolécules. Aussi l’identification des modifications post-traductionnelles des protéines induites par la fumée de cigarette s’avère être un enjeu majeur à la compréhension de certaines pathologies telles que les cancers ou les maladies cardiovasculaires.L’objectif de ce travail a été de développer une méthode d’analyse basée sur la spectrométrie de masse à haute résolution afin d’identifier et de localiser les modifications des protéines exposées à la phase gazeuse de la fumée de cigarette. Deux techniques ont été utilisées : l’analyse MALDI-TOF-TOF et l’analyse nanoESI-FT-ICR couplée à la nano chromatographie liquide. Dans le but d’optimiser la réaction avec la fumée de cigarette, des modèles de réactions ont été développés sur des peptides et protéines standards. Ainsi des réactions d’oxydation et de nitration ont été effectués à partir des radicaux libres HO° et NO2° tandis que des réactions de formation d’adduits ont été réalisées à partir d’un équivalent d’aldéhyde (formaldéhyde, acétaldehyde, malonaldéhyde, acroléine, crotonaldéhyde et glyoxal). Les mêmes standards protéiques ont ensuite été exposés à la fumée de cigarette à l’aide d’une machine à fumer. Par comparaison avec les modèles de réaction, des adduits provenant de l’acétaldéhyde, de l’acroléine et du crotonaldéhyde ont pu être identifiés et localisés sur des résidus lysines spécifiques. Ces résultats ont permis de mettre en évidence que les protéines étaient majoritairement modifiées par les aldéhydes contenus dans la fumée de cigarette.