Évaluation de la réponse immunitaire systémique à une glycoprotéine virale recombinante E2 microencapsulée et optimisation de la capture cellulaire de microsphères par greffage de ligands

Evaluation of the systemic immune response to a glycoprotein E2 loaded in microspheres and optimization of the cell uptake of microspheres by ligand grafting

• Auteur / Autrice : Nolwenn Brandhonneur
• Direction : Pascal Le Corre, Marie-Frédérique Le Potier
• Type : Thèse de doctorat
• Discipline(s) : Biologie
• Date : Soutenance en 2009
• Etablissement(s) : Rennes 1
• Ecole(s) doctorale(s) : École doctorale Vie-Agro-Santé (Rennes)
• Partenaire(s) de recherche : Autre partenaire : Université européenne de Bretagne (2007-2016)

Mots clés

Mots clés contrôlés

Immunité muqueuse

Macrophages

Phagocytose

Vaccination

Antigènes viraux

Microsphères (pharmacie)

Résumé

La majorité des infections débute par contact muqueux et l’administration d’un vaccin au site de pénétration de l’agent pathogène est souvent nécessaire à l’induction d’une immunité protectrice. Notre travail porte sur la conception de vecteurs polymériques microparticulaires chargé avec un antigène d’intérêt, la glycoprotéine purifiée recombinante E2 (rE2) destinés à une vaccination mucosale. Dans ce contexte, nous avons évalué le potentiel vaccinal de la rE2 après microencapsulation au sein de microsphères de copolymères d’acides lactique et glycolique (PLGA) chez le lapin par différentes voies d’administration (intramusculaire, orale et nasale). L’administration nasale engendre une production d’anticorps sériques spécifiques moins variable et plus intense que l’administration orale. Afin d’optimiser l’accessibilité aux cellules immunocompétentes, nous avons étudié l’influence du greffage de différents ligands (WGA, motif RGD, mannose) sur la capture de microsphères de PLGA par des macrophages. Ce travail a montré que le greffage de ligands augmente de manière significative la capture des microsphères. Nous avons également observé l’implication de deux phénomènes simultanés, un phénomène actif, spécifique et un phénomène passif, non spécifique. La contribution relative de chacun de ces phénomènes sur la capture totale est variable selon le ligand et est dépendante du ratio particules/cellules.

The majority of infections starts with mucosal contact and the administration of vaccine directly at the site of pathogen entry is often necessary to induce a protective immunity. Our study focused on the design of polymeric microparticles loaded with a purified recombinant glycoprotein E2 (rE2) for mucosal vaccination. For that purpose, we evaluated the vaccine potential of rE2 loaded in PLGA microspheres in rabbits after administration by different routes (intramuscular, oral and nasal). The nasal administration induced the production of specific serum antibodies which is less variable and more significant than after oral administration. To optimize the accessibility to immunocompetent cells, we studied the influence of ligand grafting (WGA, an RGD containing-peptide and mannose-PEG3-NH2) on the rate and intensity of uptake of PLGA microparticles by macrophages. This work showed that ligand grafting enhanced the uptake of microparticles. We also observed the simultaneous presence of two phenomena, i. E. , a specific and a non-specific process. The relative contribution of specific and non-specific processes to the overall uptake varied greatly according to the ligands, and was dependent on the particle-to-cell ratio.