Evaluation de l'efficacité d'un peptide pour la maîtrise des légionelles dans l'eau
Auteur / Autrice : | Nicolas Girardin |
Direction : | Yann Héchard, Jean-Marc Berjeaud |
Type : | Thèse de doctorat |
Discipline(s) : | Recherche clinique, innovation technologique, santé publique |
Date : | Soutenance en 2009 |
Etablissement(s) : | Poitiers |
Mots clés
Résumé
Les tours aéroréfrigérantes sont régulièrement mises en cause lors d'épidémies de légionellose et le respect des seuils réglementaires en L. Pneumophila, au sein de ces installations, nécessite l'utilisation de composés biocides. Un peptide sécrété par Staphylococcus warneri RK a été breveté en 2006 pour son activité anti-Legionella sous le nom de warnéricine RK. Dans le contexte actuel de diminution de l'impact des biocides sur l'environnement, l'objectif de cette étude a été de déterminer si la warnéricine RK, de par sa structure protéique et sa spécificité d'action, pouvait devenir un outil innovant pour la lutte raisonnée contre Legionella dans les circuits de tours aéroréfrigérantes. Dans la première partie de ce travail, l'étude de l'activité de la warnéricine RK contre des souches retrouvées dans les réseaux d'eau, a montré que son spectre d'activité est restreint au genre Legionella et à quelques souches de Bacillus. Ce peptide présente des résultats d'activité intéressants, dans des milieux de culture où il inhibe la croissance de L. Pneumophila à partir de 3,1 μg/mL et, dans l'eau déminéralisée où, à une concentration de 6,25 μg/mL, il réduit de 99 % la quantité de légionelles. La seconde partie de ce travail a consisté à développer des méthodes de production de grandes quantités de ce peptide afin de répondre aux besoins d’essais en simulateurs réseau ou en eaux de réseau. Deux approches de production ont été évaluées, à partir de la souche d'origine et à partir de souches d’E. Coli recombinantes. Les techniques développées ont permis la production de warnéricines recombinantes actives ainsi que la production d'un mélange de peptides actifs contre L. Pneumophila, provenant de la purification partielle du surnageant de S. Warneri RK. La dernière partie de ce travail a consisté à évaluer l'activité de la warnéricine RK contre les légionelles dans des conditions proches de celles retrouvées dans les tours aéroréfrigérantes. Suite à ces essais, il a été montré que certains sels pourraient être impliqués dans la précipitation de la warnéricine RK dans les eaux de réseau et dans les eaux de tours aéroréfrigérantes. Il semblerait également que, dans des conditions proches de celles retrouvées dans les circuits de tours aéroréfrigérantes, d'autres facteurs comme la présence d'autres microorganismes ou l'état physiologique des légionelles puissent limiter l’activité de la warnéricine RK.