Recherche et caractérisation de nouveaux mutants de mémoire à long terme chez la drosophile

Discovery of new long term memory mutant in drosophila melanogaster

• Auteur / Autrice : Benjamin Kottler
• Direction : Thomas Préat
• Type : Thèse de doctorat
• Discipline(s) : Sciences biologiques. Génétique
• Date : Soutenance en 2009
• Etablissement(s) : Paris 11
• Partenaire(s) de recherche : Autre partenaire : Université de Paris-Sud. Faculté des sciences d'Orsay (Essonne)

Mots clés

Mots clés contrôlés

Synthèse protéique

Mémoire à long terme

Drosophila melanogaster

Résumé

Mon projet de recherche fut d’utiliser les progrès de la génétique et les capacités comportementales de la drosophile pour découvrir de nouveaux gènes impliqués dans des processus mnésiques à long terme. Grâce à un conditionnement olfactif de type pavlovien, associant odeur et chocs électriques, nous avons criblé une centaines de lignées transgéniques présentant une insertion d’un élément transposable dans un gène s’ exprimant au niveau des corps pédonculés qui sont le centre anatomique de la mémoire olfactive. Ce crible a ainsi permis l’identification de deux nouvelles lignées mutantes pour la formation de la mémoire à long terme. Après avoir étudié les lignées P-Gal4, vérifié que l’anatomie des corps pédonculés ne présentait pas de défaut, nous avons identifié les gènes affectés, et construit des lignées exprimant des RNAI contre ces gènes. L’expression des RNAI uniquement à l’état adulte au niveau des corps pédonculés conduit à une chute spécifique de la mémoire à long terme. Les autres phases de mémoire sont normales. L’un de ces gènes est totalement inconnu et nécessitera d’autres études pour déterminer sa fonction biochimique et son fonctionnement. L’autre gène est debra, qui semble être impliqué dans des phénomènes d’ubiquitination.

My project takes advantage of genetic and behavioural tools to discover new drosophila long-term memory specific mutants. Using a behavioural screen based on a Pavlovian procedure that pairs odors with electric-shock. I found from an initial panel of 100 strains two lines that present a specific long-term memory defect. In a subsequent molecular genetic analysis. I identified the location of the mutation in both lines, and studies the size of the affected RNA transcripts by northern blot analysis. I tested whether levels of these transcripts varied over time after conditioning usin qRT-PCR. Finally, I constructed RNAi line to confirm the role of these the role these genes in memory. One of the genes identified has not been assigned to a molecular function, and the other is debra, a gene that has been shown to be involved in protein degradation via ubiquitination