Rôle des facteurs de transcription HIF et CHOP-10 dans le processus de néovascularisation post-ischémique

Neovascularization Involvement of transcriptional factor HIF and CHOP-10 in the post-ischemic

• Auteur / Autrice : Céline Loinard
• Direction : Jean-Sébastien Silvestre
• Type : Thèse de doctorat
• Discipline(s) : Biologie et pharmacologie de l'hémostase et des vaisseaux
• Date : Soutenance en 2009
• Etablissement(s) : Paris 5
• Ecole(s) doctorale(s) : École doctorale du Médicament (....-2009 ; Paris)
• Partenaire(s) de recherche : autre partenaire : Université Paris Descartes. Faculté de pharmacie de Paris (....-2019)

Mots clés

Mots clés contrôlés

Souris de laboratoire

Modèles animaux

Diabètes

Inflammation

Anoxie

Ischémie

Néovascularisation

Résumé

Le développement de stratégie thérapeutique stimulant la formation de nouveaux vaisseaux reste un challenge clinique majeur dans le traitement des pathologies ischémiques. Nous avons mis en évidence le potentiel thérapeutique du «silencing» des prolines hydroxylases (PHD), par shRNA, au niveau du territoire ischémique dans un contexte nondiab et diab. Cette inhibition spécifique et transitoire de la PHD ciblée se traduit par une forte augmentation de HIF-1a, VEGF, NOSe et également par une amplification du recrutement des macrophages dans le muscle ischémié stimulant ainsi le processus de néovascularisation. Finalement, la co-administration de shHIF-1a et shPHD3 abroge les effets induits par shPHD3 démontrant ainsi que l’activation de HIF-1a soustend la néovascularisation. Ces travaux démontrent que l’inhibition des PHD peut être considéré comme une nouvelle stratégie de néovascularisation thérapeutique. Nous avons également montré que CHOP-10 inhibe le processus de néovascularisation post-ischémique et le potentiel pro-angiogénique des BM-MNC. CHOP-10 est fortement augmenté après l’ischémie et l’induction du diabète dans le muscle et les BM-MNC. Les souris KO CHOP-10 nondiab et diab présentent une augmentation de la NOSe et une réduction du nombre de cellules apoptotiques dans le muscle ischémique et les BM-MNC, qui se traduit par une augmentation du processus de néovascularisation. In vitro, nous démontrons que CHOP-10 régule négativement le promoteur de la NOSe. D’ailleurs les souris invalidées pour CHOP-10 et NOSe présentent un déficit de néovaisseaux dans le territoire ischémique. Cette étude identifie le facteur de transcription CHOP-10 comme un important modulateur de la formation et de la maturation des vaisseaux

Therapeutic angiogenesis is viewed as a highly promising strategy to ensure revascularization of ischemic tissues by promoting the growth of new vessels or the maturation of pre-existing ones. First, we investigated whether inhibition of PHD via upregulating HIF might promote post-ischemic neovascularization. PHDs silencing induced a specific and transient downregulation of their respective mRNA and protein levels and as expected upregulated HIF-1a. As a consequence levels of pro-angiogenic and pro-arteriogenic actors were enhanced leading to activation of post-ischemic inflammatory response and neovascularization. Of interest, co-administration of shHIF-1a with shPHD3 abrogated shPHD3-related effects suggesting that activation of HIF-1a-dependent pathways mediated the pro-angiogenic effects of PHD silencing. Inhibition of PHD activated endogenous HIF-a signaling and subsequently promoted post-ischemic neovascularization. Second, we analyzed the role of CHOP-10 in postnatal neovascularization. In skeletal muscle and BM-MNC, CHOP-10 was upregulated by ischemia and diabetes. Neovascularization process was increased in nondiab and diab CHOP-10 KO mice. This effect was associated with a reduction in the number of apoptotic cells and an upregulation of eNOS levels. In line with these results, overexpression of CHOP-10 inhibited basal transcriptional activation of the eNOS promoter. Interestingly, enhanced post-ischemic neovascularization in CHOP-10 KO was fully blunted in CHOP-10/eNOS KO mice. This study identifies CHOP-10 as an important transcription factor modulating vessel formation and maturation.