Analyse de l'équipement chromosomique et de la fragmentation de l'ADN dans les spermatozoïdes d'hommes infertiles

Analysis of chromosomal equipment and DNA fragmentation in spermatozoa of infertile men

• Auteur / Autrice : Aurore Perrin
• Direction : Marc De Braekeleer
• Type : Thèse de doctorat
• Discipline(s) : Sciences de la vie et de la santé
• Date : Soutenance en 2009
• Etablissement(s) : Brest

Mots clés

Mots clés contrôlés

Génétique

Stérilité masculine

Mots clés libres

Infertilité

Spermatozoïdes

Anomalies chromosomiques

Ségrégation méiotique

Fragmentation

Infertility

Spermatozoa

Chromosomal abnormalities

Meiotic segregation

Fragmentation

Résumé

Parmi les 10 à 15% de couples confrontés à des problèmes d’infertilité, l’étiologie est masculine dans la moitié des cas. La présence d’une anomalie chromosomique constitutionnelle, ou d’une anomalie génique (microdélétions du chromosome Y, mutations dans Aurora Kinase c-AURKc-) ou encore un ADN spermatique fragmenté peuvent être une des causes d’infertilité masculine. Ce travail a consisté à étudier, par FISH (Fluorescent in situ Hybridization), l’équipement chromosomique des gamètes d’hommes infertiles que le caryotype lymphocytaire soit normal ou non et le taux de fragmentation de l’ADN spermatique chez ces patients, par la méthode TUNEL (Terminal Uridine Nick-end Labeling). Par ailleurs, nous avons mis en place des techniques permettant de rechercher la présence de microdélétions sur le chromosome Y et de mutations sur AURKc. Chez des patients présentant une tératozoospermie, le taux de gamètes chromosomiquement déséquilibrés s’échelonne de 0,47% à 100%. De plus, leur taux de fragmentation est 12 fois supérieur à celui des témoins (14,6% versus 1,2%). Chez les patients porteurs d’une anomalie de structure constitutionnelle, l’analyse de la ségrégation méiotique révèle des taux de gamètes chromosomiquement déséquilibrés de 0% à 65,60% selon l’anomalie de structure (translocation réciproque équilibrée. Translocation robertsonienne ou inversion péricentrique). Leur taux de fragmentation de l’ADN spermatique est compris entre 1% et 27%. Les gamètes chromosomiquement déséquilibrés ont un ADN plus fragmenté que les normaux/équilibrés. L’étude de la ségrégation méiotique et de la fragmentation sont complémentaires dans l’exploration de l’infertilité masculine.

Among 10 to 15% of couples with infertility problems, etiology is masculine in half of the cases. The presence of a constitutional chromosomal abnormality, or o genetic abnormality (microdeletions of chromosome Y, mutations in Aurora Kinase c-AURKc-) or DNA sperm fragmentation could be one of the causes of infertility. This work bas consisted in studying, by FISH (Fluorescent in situ Hybridization), the chromosomal equipment of gametes of infertile men having a normal lymphocytic karyotype or not and the rate of sperm DNA fragmentation in these patients, by TUNEL (Terminal Uridine Nick-end Labeling). Otherwise, we have developed techniques to detect the presence of microdeletions on chromosome Y and mutations of AURKc. In patients with teratozoospermia, the rate of unbalanced gametes ranges from 0. 47% to l00%. Moreover, they have o fragmentation rate 12 times higher than controls (14. 6% versus 1. 2%). In patients with a constitutional structural abnormality, the analysis of meiotic segregation indicates that the rate of chromosomal unbalanced gametes varies from 0% to 65. 60% in function of the structural abnormality (balanced reciprocal translocation, robertsonian translocation or pericentric inversion). Their percentage of fragmentation DNA sperm is between 1% and 27%. The unbalanced gametes have more fragmented DNA than normal/balanced gametes. The studies of meiotic segregation and DNA fragmentation are complementary in exploration of mole infertility.