Etude des gènes régulés par le PACAP au cours de la différenciation des cellules de pheochromocytome : rôle de l’inhibitor of DNA Binding 3 et de la selenoproteine T

Characterisation of pacap-regulated genes during pheochromocytoma cell differentiation: role of inhibitor of dna binding 3 and selenoprotein T.

• Auteur / Autrice : Hafida Ghzili
• Direction : Youssef Anouar
• Type : Thèse de doctorat
• Discipline(s) : Biologie cellulaire. Neurosciences
• Date : Soutenance en 2008
• Etablissement(s) : Rouen

Mots clés

Mots clés contrôlés

Sécrétion

Calréticulines

Différenciation cellulaire

Neuropeptides

Mots clés libres

Pacap

Cellules sympathosurrenaliennes

Selenoproteine T

Inhibitor of DNA binding 3

Résumé

Nous avons étudié le rôle de deux gènes stimulés par le neuropeptide PACAP au cours de la différenciation des cellules sympatho-surrénaliennes PC12. Le facteur de régulation transcriptionnelle inhibitor of dna binging 3 (Id3) est un gène de réponse précoce dont l’expression est stimulée par le PACAP suite à une élévation de l’AMPc. La surexpression de ce gène dans les cellules PC12 augmente la survie cellulaire, contribuant ainsi à l’effet anti-apoptotique du PACAP. L’étude de la sélénoprotéine T a montré que son ARNm est exprimé de façon ubiquiste et que la protéine est localisée dans le réticulum endoplasmique. La surexpression de la SelT augmente la concentration calcique intracellulaire et l’inhibition de son expression par ARN interférence abolit l’élévation de la concentration calcique induite par le PACAP dans ces cellules. Enfin, la SelT participe à l’effet stimulateur du PACAP sur la sécrétion dans des cellules neuroendocrines différenciées.

The neuropeptide PACAP induces neuroendocrine differentiation of rat pheochromocytoma PC12 cells. Our aim was to determine the functions of two genes up-regulated by PACAP in PC12 cells. The helix-loop-helix factor Id3 is an early PACAP and cAMP responsive gene. Overexpression of Id3 in PC12 cells increased the number of living cells in basal condition and after exposure to oxidative stress, indicating that Id3 may contribute to the pro-survival effect of the neuropeptide during neuroendocrine cell differentiation. Selenoprotein T functional characterization revealed that SelT gene up-regulation by PACAP in PC12 cells depends on cAMP and calcium. This protein is expressed in the endoplasmic reticulum. We found that enhanced SelT expression provokes an increase in cytosolic calcium concentration. Conversely, SelT gene knockdown inhibited the PACAP-induced increase in intracellular calcium concentration and subsequent hormone secretion in differentiated neuroendocrine cells.