Lipoplexes targeting the CD44 hyaluronic acid receptor for efficient transfection of breast cancer cells

Conception de lipoplexes cationiques conjugués à l'acide hyaluronique pour le ciblage de l'ADN vers des cellules exprimant le récepteur CD44

• Auteur / Autrice : Claudio Surace
• Direction : Elias Fattal
• Type : Thèse de doctorat
• Discipline(s) : Pharmacie
• Date : Soutenance en 2008
• Etablissement(s) : Paris 11

Mots clés

Mots clés contrôlés

Liposomes

Antigène CD44

Hyaluronique, Acide

Thérapie génique

Mots clés libres

Liposomes cationiques

Lipoplexes

Acide hyaluronique

Récepteur CD44

Thérapie génique

Résumé

L'objectif de cette thèse a été de concevoir et de formuler des liposomes ainsi que des lipoplexes contentant un phospholipide (DOPE) conjugué à l'acide hyaluronique (HA-DOPE). Ces liposomes permettent le ciblage du récepteur CD44 surexprimé sur des cellules de cancer du sein et ainsi favorisent le tranfert des gènes vers ces cellules. Les liposomes et les lipoplexes ont été caractérisés en mesurant la taille, le potentiel zêta et leur cytotoxicité et efficacité de transfection sur des cellules du cancer du sein, les MDA-MB231 et les MCF-7. Sur les MDA exprimant CD44, l'efficacité de transfection s'est révélée meilleure que pour les lipoplexes utilisés dans les MCF-7 exprimant faiblement CD44. Des études de microscopie confocale ont démontré que les lipoplexes sont internalisés par un mécanisme d'endocytose qui serait médié par le récepteur dans les MDA-MB321 et indépendant de la liaison à CD44 dans le cas des MCF-7.

Cationic liposomes containing a hyaluronic acid-dioleoylphosphatidylethanolamine (HA-DOPE) conjugate were designed to target the CD44 receptor on breast cancer cells (MDA-MB231 and MCF-7). Liposomes made of a cationic lipid (DE) associated to DOPE and containing or not HA-DOPE were prepared, characterized, and complexed with Plasmid DNApCMV-luc. Lipoplexes were characterized and cytotoxicity and transfection efficiency were tested on MDA-MB321 and MCF-7 cells. Lipoplexes were not toxic and the cells as they possess a high number of CD44 receptors. The internalisation of liposomes, as revealec by confocal microscopy, occurred through endocytosis mediated by the CD44 receptor. In conclusion, cationic liposomes containing HA-DOPE conjugate resulted to be a good carrier for specific gene delivery to CD44 expressing cells.