Développement d'un vaccin prophylactique et thérapeutique contre le VIH/SIDA : induction d'anticorps neutralisant le VIH-1 par des peptides synthétiques dérivés de l'épitope CBD1

Development of a prophylactic and therapeutic vaccine against the HIV / AIDS: Induction of neutralizing antibodies HIV-1 by peptides Synthetic derivatives of the epitope CBD1

• Auteur / Autrice : Rima Benferhat
• Direction : Ara Hovanessian
• Type : Thèse de doctorat
• Discipline(s) : Microbiologie et virologie
• Date : Soutenance en 2008
• Etablissement(s) : Paris 7

Mots clés

Mots clés contrôlés

Protéine d'enveloppe gp41 du VIH

Cartographie épitopique

immunologie

VIH-1 (Virus de l'Immunodéficience Humaine de type 1)

Cavéoline-1

Vaccins contre le SIDA

Résumé

Le peptide CBD1, correspondant au domaine conservé dans la gp41 qui fixe la cavéoline-1, induit des anticorps qui inhibent l'infection des lymphocytes T CD4+ par différents isolats primaires du VIH-1. Des expériences effectuées chez le lapin, le cobaye et la souris indiquent que les anticorps neutralisants dirigés contre le peptide CBD-1, réagissent avec des déterminants conformationnels localisés dans une séquence de 10 acides aminés : IWNNMTWMQW qui correspond au motif CBM (Caveolin-1 Binding Motif). Les peptides dérivés du CBM sont uniquement immunogènes sous la forme de peptides chimériques constitués d'un épitope T auxiliaire fusionnés à différentes portions de la séquence du CBM. Les anticorps polyclonaux et monoclonaux que nous avons génères contre ces peptides chimériques ont démontré l'existence des plusieurs déterminants conformationnels distincts qui se chevauchent dans l'épitope CBD1. En accord avec ceci, on observe un effet synergique avec des mélanges des sérums immuns neutralisants qui sont spécifiques pour des peptides dérivés de l'épitope CBD1. Nos résultats suggèrent que l'emploi d'un cocktail composé de plusieurs peptides dérivés du CBD1 permettra d'obtenir une réponse humorale efficace contre différents déterminants neutralisants.

The CBD1 peptide (SLEQIWNNMTWMQWDK) corresponding to the consensus caveolin-1 binding domain in gp41, elicits in rabbits the production of antibodies that inhibit infection of primary CD4+ T lymphocytes by various primary HIV-1 isolates. Several studies in rabbits, guinea pigs and mice, indicated that neutralizing antibodies raised against the CBD1 peptide react with conformational determinants in the sequence IWNNMTWMQW that constitutes the highly conserved caveolin-1 binding motif (CBM). We showed that this peptide by itself is not immunogenic, but when fused with various T helper epitopes it induces specific antibodies that neutralize HIV-1 infection. Chimeric peptides synthesized with a T helper epitope fused to CBM-derived peptides of 5 to 10 amino acid residues, induced HIV-1 neutralizing antibodies that reacted with multiple overlapping determinants. The mixture of such neutralizing immune sera resulted in a synergistic neutralizing activity against HIV-1 infection. Finally, we used the various CBD1- and the CBM-based immunogens to generate murine monoclonal antibodies (mAb). Altogether, we isolated 15 mAbs with various degrees of HIV-1 neutralizing activity. These mAbs were characterized into 7 main groups by virtue of their reactivity with the CBD1- and the CBM-based peptides, thus confirming the existence of distinct neutralizing determinants in the CED 1 epitope.