Comprendre et maîtriser l'activation de la coagulation en transplantation rénale : évaluation d'un antithrombine direct dans un modèle d'autogreffe chez le porc

Anticoagulant therapy in renal transplantation : direct antithrombin melagatran evaluation in a porcine model of kidney auto-transplantation

• Auteur / Autrice : Aude Belliard
• Direction : Gérard Mauco, Marie-Claude Guillin
• Type : Thèse de doctorat
• Discipline(s) : Biologie et pharmacologie de l'hémostase et des vaisseaux
• Date : Soutenance en 2008
• Etablissement(s) : Paris 7

Mots clés

Mots clés contrôlés

Suidae

Anticoagulants

Ischémie chaude

Coagulation sanguine

Lésion d'ischémie-reperfusion

Transplantation rénale

Résumé

L'ischémie-reperfusion (IR) participe aux dysfonctions rénales lors du retard de fonction primaire observé après transplantation rénale. L'IR initie l'activation des voies de la coagulation et de l'inflammation dans le réseau vasculaire du rein. Afin de limiter ces lésions lors de la greffe, l'administration préventive de Melagatran, un anti-thrombine direct, a été évaluée dans un modèle d'autogreffe de rein chez le porc. Ce model comprenant 60 min d'ischémie rénale in situ, suivi de 24 h de conservation, conduit à une perte totale de fonction du greffon, irréversible pour la plupart des animaux. Le Melagatran en injection IV et/ou ajouté à le solution de conservation limite la tubulonéphrite et améliore la reprise de fonction rénale au cours des 7 jours post-opératoires. Lors de l'IR, les modifications du flux sanguin entraînent une activation cellulaire qui conduit à la formation d'agrégats plaquette/monocyte (APM) responsables de l'apparition de Facteur Tissulaire (FT) procoagulant en intravasculaire. En plus de l'action connue du Melagatran sur la prévention de l'activation thrombine-dépendante des plaquettes, son effet antiplaquettaire direct a récemment été suggéré. Afin de mieux définir les effets du Melagatran dans le sang après IR, nous avons étudié son effet potentiel sur la limitation de la production de FT par les APM issus de sang périphérique prélevé sur volontaires sains. Les résultats suggèrent une déplétion de l'expression protéique d'une isoforme plaquettaire du FT (54kDa) ainsi qu'une diminution significative de sa présentation antigénique à la surface des APM. Le Melagatran améliore la survie du greffon rénal en limitant l'entretien de la coagulation.

Renal ischemia-reperfusion injury (IRI) is the leading cause of acute renal failure in delayed graft function after kidney transplant. Renal IRI resulted from an early activation of the coagulation/inflammation cross-talk in renal vasculature during ischemic phase. In order to limit IRI from kidney transplantation I evaluated a preventive administration of Melagatran, a direct antithrombin drug, in a porcine kidney autograft model. This model including 60 min of kidney graft warm ischemia followed by 24h of cold preservation that induced severe function impairment and rapid tissue inflammation leading to the graft loss. Melagatran IV injected and/or added in preservative solution limited tubulonephritis and improve renal function uptake during the week after kidney reperfusion. In ischemia reperfusion blood flow conditions, activated platelets form heterotypic cells complexes with circulating monocytes that could induce procoagulant Tissue Factor (TF) surface protein exposure leading to thrombin generation. Resides preventing thé thrombin-dependent platelet activation a Melagatran direct antiplatelet effect has ever been suggested. Intended to clarify the Melagatran intravascular anticoagulation mechanisms, we studied its preventing effects on TF surface and total expression in human blood platelets/monocytes aggregates. I have found that Melagatran depleted either a platelet specific 54kDa TF protein isoform or aggregates TF antigen presentation. In conclusion, Melagatran administration improve graft outcome reducing renal IRI in a model of warm+cold ischemia probably by preventing the TF-dependent thrombin generation positive feedback by a direct action on platelets.