Le facteur Willebrand : de ses défauts génétiques aux aspects cellulaires de sa fonction et de son catabolisme

Von willebrand factor : Journey from gene defects to cellular aspects of its function and catabolism

• Auteur / Autrice : Shirin Shahbazi
• Direction : Cécile Denis
• Type : Thèse de doctorat
• Discipline(s) : Biologie et pharmacologie de l'hémostase et des vaisseaux
• Date : Soutenance en 2008
• Etablissement(s) : Paris 7

Mots clés

Mots clés contrôlés

Rate

Corps de Weibel-Palade

Ostéoprotégérine

Macrophages

Facteur de von Willebrand

Résumé

Le facteur Willebrand (VWF) est une glycoprotéine plasmatique dont la fonction principale consiste à promouvoir l'adhésion et l'agrégation des plaquettes au sous-endothélium en cas de brèche vasculaire. Une absence totale en VWF conduit à la maladie de Willebrand (VWD) de type 3, un syndrome hémorragique rare. Dans la première partie de ce travail, nous avons séquence l'ADN de patients ayant une VWD de type 3, ce qui nous a permis de mettre en évidence trois nouvelles mutations. Le VWF est stocké dans des granules spécifiques des cellules endothéliales, les corps de Weibel-Palade (WP). En absence de VWF, ces corps de WP ne peuvent se former. Deux protéines, l'ostéoprotégérine (OPG) impliquée dans la protection osseuse et l'angiopoïétine 2 (Ang-2), impliquée dans l'angiogenèse et l'inflammation sont présentes dans les corps de WP. Nous avons caractérisé l'interaction entre le VWF et ces deux protéines. Nous avons pu montrer que le VWF se lie de façon spécifique à l'OPG et à l'Ang-2 et nous avons identifié les régions du VWF impliquées dans ces interactions. Il semble que le VWF joue le rôle de protéine chaperone pour diriger l'OPG ou l'Ang-2 vers les corps de WP et peut par conséquent réguler leur biodisponibilité. Un autre aspect de ce travail concerne l'élucidation des aspects cellulaires de la clairance du VWF. Nous avons désormais identifié les macrophages hépatiques et spléniques comme étant les cellules permettant l'endocytose du VWF. De plus, le VWF étant la protéine porteuse du facteur VIII dans le plasma, nous avons observé que les deux protéines étaient co-localisées dans les macrophages, suggérant qu'elles sont éliminées en tant qu'entité unique.

Von Willebrand factor (VWF) is a plasma glycoprotein whose main function consists in mediating platelet adhesion to the subendothelium and platelet aggregation following vascular injury. Complete absence of VWF leads to von Willebrand disease (VWD) type 3, a rare hemorrhagic disorder. In the first part of this thesis we have sequenced the exons of the vw/gene in a cohort of 10 type 3 VWD patients, a study that led to the identification of three new mutations. VWF is stored in specific granules of endothelial cells, the Weibel-Palade (WP) bodies. In the absence of VWF, no WP bodies can form. Two proteins were recently identified as being present in WP bodies: osteoprotegein (OPG), involved in bone protection and angiopoietin-2 (Ang-2) involved in angiogenesis and inflammation. A major part of this work relates to the characterization of the interaction between VWF and these two proteins. We have shown that VWF binds specifically to OPG and Ang-2 and we have identified the regions of the VWF molecule involved in these interactions. VWF acts as a chaperone molecule to direct OPG and Ang-2 to WP bodies and can therefore regulate their bioavailability. Another aspect of this work concerns the elucidation of the cellular aspects of VWF clearance. Indeed, very little information was available about the mechanism by which VWF is removed from the circulation. We have now identified liver and spleen macrophages as the cells mediating VWF uptake in vivo. Since VWF is the carrier of the anti hemophilic factor VIII in plasma, we also observed that both proteins co-localize in the macrophages, suggesting that they are cleared as a single entity.