Biopuces à ADN pan-génomique de Plasmodium falciparum : mise au point d'une technique de marquage par radio-isotope adaptée aux petits échantillons biologiques et application à l'étude de la pathogénocité du parasite

Pan-genomic DNA chips of Plasmodium falciparum : development of a method using radio-labelled probes adapted to minute biological samples and application to the study of parasite pathogenicity

• Auteur / Autrice : Anthony Siau
• Direction : Dominique Mazier
• Type : Thèse de doctorat
• Discipline(s) : Parasitologie
• Date : Soutenance en 2008
• Etablissement(s) : Paris 6

Mots clés

Mots clés libres

Plasmodium

Biopuce à ADN

Transcriptome

Arn

Radioactivité

Sporozoïte

Isolats de terrain

Résumé

L’exploration de l’ensemble du transcriptome de P. Falciparum est désormais accessible grâce à la technique des biopuces à ADN sur lame de verre (microarray). Mais cette technologie puissante reste cependant limitée à l’étude d’échantillons biologiques dont les quantités d’ARN totaux sont importantes. Bien que de nombreuses méthodes aient été développées afin d’adapter ces techniques aux faibles quantités d’ARN total, nous avons choisi d��utiliser une approche par biopuce à ADN hybridé à des sondes marquées avec des radio-isotopes, réputée très sensible. En comparant le transcriptome d’isolats de terrain de P. Falciparum susceptibles d’induire ou non in vitro l’apoptose des cellules endothéliales, nous avons pu identifier des gènes préférentiellement surexprimés dans les isolats apoptogènes. Par ailleurs, la technologie des biopuces radioactives a été aussi utilisée pour étudier les premières phases du développement des sporozoïtes de P. Falciparum dans son hôte. Nous avons ainsi pu identifier de nombreux gènes potentiellement impliqués dans l’infection hépatique.