Perception du goût du gras par le récepteur CD36 dans la papille caliciforme de souris : étude des voies de signalisation

Taste perception of fat via CD36 receptor in the mice circumvallate papillae : study of the signaling pathways

• Auteur / Autrice : Abdelghani El Yassimi
• Direction : Naim Akhtar Khan, Aziz Hichami
• Type : Thèse de doctorat
• Discipline(s) : Sciences de la vie. Physiologie cellulaire et signalisation lipidique
• Date : Soutenance en 2008
• Etablissement(s) : Dijon

Mots clés

Mots clés contrôlés

Transduction du signal cellulaire

Goût

Résumé

FAT/CD36 est impliqué dans la détection et la perception de goût lipidique. Cependant, les mécanismes moléculaires impliqués dans la signalisation déclenchés par ce récepteur dans ces cellules restent inconnus. Dans ce travail, nous avons purifié les cellules qui expriment CD36 à partir des bourgeons du goût de la papille caliciforme chez la souris. Pour élucider les voies de transduction du signal, générées par les AGPI, nous avons utilisé l’acide linoléique (AL). Nous avons observé que l’AL induit une augmentation de la concentration du calcium libre intracellulaire, [Ca2+]i, via l’activation du FAT/CD36. Le SSO, un inhibiteur de FAT/CD36, réduit cette augmentation de [Ca2+]i induite par l’AL. Nous avons aussi observé que l’AL provoquait la phosphorylation des résidus tyrosines de la protéine Fyn59 et Yes62 de la famille SRC kinases. Les inhibiteurs des SRC-kinases et ceux des canaux SOC baissent l’augmentation de [Ca2+]i dans ces cellules. Ces résultats nous permettent d’avancer l’hypothèse selon laquelle l’AL induit l’activation des SRC-kinases et favorise l’influx calcique dans les cellules CD36-positives. La RT-qPCR a révélé que les cellules gustatives CD36-positives expriment les ARNm des enzymes telles que la TPH-1, l’AADC, l’TH, la DBH qui sont impliquées dans la synthèse des neurotransmetteurs monoaminergiques. L’addition d’AL à ces cellules a induit la libération de 5-HT et de noradrénaline à partir des cellules CD36-positives. Cette libération a été bloquée par les inhibiteurs des canaux SOC et ceux des SRC-PTK. Ces résultats ont montré que la liaison d’AL avec CD36 augmente la [Ca2+]i, induit la phosphorylation des SRC-PTK et, la libération de 5-HT et NA qui pourraient ainsi être impliqués dans la signalisation vers les fibres nerveuses afférentes et par conséquent, la transmission du signal du goût du gras vers le système nerveux central.

We isolated CD36-positive cells from mouse CVP and investigated intracellular signaling events triggered by a polyunsaturated long chain fatty acid, i. E. , linoleic acid (LA). LA induced increases in free intracellular calcium concentrations, [Ca2+]i, by recruiting calcium from endoplasmic reticulum (ER) pool via IP3 production, followed by calcium influx via opening of store operated calcium (SOC) channels. LA also induced phosphorylation of SRC-protein tyrosine kinases (PTKs), particularly of Fyn59 and Yes62. LA-evoked phosphorylation of Fyn59 and Yes62 was implicated in the activation of SOC channels. RT-qPCR revealed that the CD36-positive lipid gustatory cells possessed mRNA of enzymes like tryptophan hydroxylase-1 (TPH-1), L-aromatic amino acid decarboxylase (AADC), tyrosine hydroxylase (TH)), dopamine beta-hydroxylase (DBH) which are involved in the synthesis of monoamine neurotransmitters. Interestingly, addition of LA to these cells induced the release of 5-HT and noradrenalin (NA) to the extracellular environment. The LA-induced release of these neurotransmitters was curtailed by a SOC channel blocker and a SRC-PTK inhibitor. These results altogether demonstrate that LA binds to mouse CD36-positive lipid gustatory cells, triggers calcium signaling and SRC-PTK phosphorylation, and induces the release of 5-HT and NA which, in turn, may be implicated in the downstream signaling to the afferent nerve fibers, thus transmitting the output signal from taste buds to the central nervous system.