Développement d'outils pour mesurer et augmenter les fréquences de recombinaison chez le maïs et Arabidopsis thaliana

Devlopment of tools to measure and increase recombination frequencies in maize and Arabidopsis thaliana

• Auteur / Autrice : Sophie Wehrkamp-Richter
• Direction : Georges Picard
• Type : Thèse de doctorat
• Discipline(s) : Physiologie et génétique moléculaire
• Date : Soutenance en 2008
• Etablissement(s) : Clermont-Ferrand 2

Mots clés

Mots clés contrôlés

Recombinaison génétique

Plantes -- Génétique moléculaire

Maïs

Arabidopsis thaliana

Résumé

L'objectif de ce travail de thèse était de développer des outils pour mesurer et augmenter les fréquences de recombinaison chez une plante d'intérêt agronomique, le maïs. La plante modèle Arabidopsis thaliana a été également utilisée pour valider plus rapidement les vecteurs développés. Différents construits rapporteurs ont été testés dans ce but : le rapporteur pPNP et un rapporteur GUS/GFP qui permet de distinguer les mécanismes de recombinaison homologue et illégitime. La capacité de détection de ces deux mécanismes a été validée à la fois chez A. Thaliana et le maïs. Les fréquences de recombinaison ont été augmentées en créant des cassures double brin (CDB) grâce à la méganucléase de levure I-Scel. Une augmentation de la RH a été obtenue chez A. Thaliana, par expression du gène I-Scel mais pas chez le maïs. En effet, il est mal exprimé dans cette plante, ainsi une version du gène optimisée pour l'expression chez le maïs a été utilisée. Ces travaux constituent une première approche, pour réaliser à terme, du ciblage de gène par recombinaison homologue chez le maïs