Étude de la résistance au lysozyme chez Enterococcus faecalis

Study of lysozyme resistance in Enterococcus faecalis

• Auteur / Autrice : Laurent Hébert
• Direction : Yanick Auffray, Abdellah Benachour
• Type : Thèse de doctorat
• Discipline(s) : Aspects moléculaires et cellulaires de la biologie
• Date : Soutenance en 2008
• Etablissement(s) : Caen

Mots clés

Mots clés contrôlés

Peptidoglycanes

Génétique microbienne

Virulence (microbiologie)

Lysozyme

Entérocoques

Résumé

Lors des deux dernières décennies, Enterococcus faecalis a émergé comme une cause majeure d'infections nosocomiales. E. Faecalis est une des rares bactéries presque complètement résistante à l'un des composés les plus importants et les plus répandus du système immunitaire inné : le lysozyme. C'est donc l'étude des causes de cette résistance qui nous a intéressé au cours de ce travail de thèse. Nous avons identifié deux gènes nommés EF0783 et EF1843, potentiellement impliqués dans la résistance au lysozyme. Les protéines codées par ces gènes partagent respectivement des homologies avec une O-acétyltransférase du peptidoglycane (OatA) de Staphylococcus aureus et une N-acétylglucosamine déacétylase (PgdA) de Streptococcus pneumoniae. Nous avons construit les mutants correspondants (DeltaEF0783 et DeltaEF1843) et le double mutant DeltaEF0783-DeltaEF1843. Nous avons montré que la mutation de EF0783 entraînait la perte des groupements O-acétyles du peptidoglycane ainsi qu'une diminution de la résistance au lysozyme. Par contre, aucun effet sur la résistance au lysozyme n'a été associé au gène EF1843. De plus, la délétion de EF0783 et/ou de EF1843 affecte significativement la capacité d'E. Faecalis à survivre dans des macrophages murins. Bien que EF0783 soit effectivement impliqué dans la résistance au lysozyme, la O-acétylation et la dé-N-acétylation ne sont pas les principaux mécanismes conférant les hauts niveaux de résistance au lysozyme à E. Faecalis. Des expériences pour identifier d'autres facteurs expliquant cette résistance au lysozyme sont à envisager.

Over the two last decades, Enterococcus faecalis has emerged as major cause of nosocomial infections. E. Faecalis is also a member of the few bacteria that are almost completely resistant to one of the most important and widespread compounds of the constitutive defence system: the lysozyme. Therefore, the bases of this high resistance to lysozyme were investigated within this thesis work. We identified two genes referred as EF0783 and EF1843, potentially involved in lysozyme resistance. Proteins encoded by these genes share homology with Staphylococcus aureus peptidoglycan O-acetyltransferase (OatA) and Streptococcus pneumoniae N-acetylglucosamine deacetylase (PgdA), respectively. We constructed the corresponding mutants (DeltaEF0783 and DeltaEF1843) and the double mutant DeltaEF0783-DeltaEF1843. We showed that EF0783 mutation leads to the loss of O-acetyl groups from the peptidoglycan and to a decrease of the lysozyme resistance. On the other hand, no effect on lysozyme sensitivity could be associated to the EF1843 gene. Moreover, the EF0783 and/or EF1843 deletions significantly affect the ability of E. Faecalis to survive within murine macrophages. While EF0783 is involved in the lysozyme resistance, the peptidoglycan O-acetylation and de-N-acetylation are not the main mechanisms conferring high levels of lysozyme resistance to E. Faecalis. Experiments aiming to identify additional factors explaining this lysozyme resistance have to be considered.