Identification d'antigènes par étude protéomique et évaluation de cinq protéines antigéniques pour le sérodiagnostic des infections à Mycoplasma pneumoniae

• Auteur / Autrice : Hélène Nuyttens
• Direction : Cécile Bébéar
• Type : Thèse de doctorat
• Discipline(s) : Sciences Biologiques et Médicales. Microbiologie
• Date : Soutenance en 2008
• Etablissement(s) : Bordeaux 2

Mots clés

Mots clés contrôlés

Diagnostic immunologique

Mycoplasma pneumoniae

Antigènes

Protéomique

Résumé

Mycoplasma pneumoniae est un pathogène humain responsable d’infections respiratoires aigües fréquemment rencontrées chez l’enfant et chez le jeune adulte. Son implication possible dans l’asthme est connue de longue date et étayée par des arguments récents. La symptomatologie respiratoire ne permet guère de différencier les infections à M. Pneumoniae de celles provoquées par d’autres agents. Un outil de diagnostic performant est donc nécessaire pour permettre la mise en place d’un traitement antibiotique rapide et adapté. Afin de mettre en évidence de nouveaux antigènes spécifiques d’une infection à M. Pneumoniae, nous avons analysé la réponse humorale de patients enfants et adultes atteints d’infection respiratoire ainsi que d’enfants asthmatiques, diagnostiqués positifs pour une infection aiguë à M. Pneumoniae. Pour cela, nous avons développé deux techniques de protéomique couplées à des tests immunologiques. Ces travaux nous ont permis d’identifier et de caractériser 47 protéines antigéniques exprimées par M. Pneumoniae lors de l’infection. Ces protéines ont été clonées et purifiées sous forme recombinante, puis testées par ELISA en utilisant des panels de sérums d’enfants et adultes atteints d’infection respiratoire ainsi que d’enfants asthmatiques. Cinq de ces 47 antigènes se sont révélés particulièrement intéressants pour le sérodiagnostic des infections à M. Pneumoniae. L’ensemble de ces travaux nous ont permis d’identifier trois antigènes chez l’enfant et deux chez l’adulte atteints d’infection respiratoire à M. Pneumoniae, ainsi qu’un antigène chez l’enfant asthmatique infecté par M. Pneumoniae, pertinents pour le sérodiagnostic de l’infection par la bactérie

Mycoplasma pneumoniae is a human pathogen which is responsible of acute respiratory tract infections common in children and young adults. An association between asthma and infection to M. Pneumoniae has been described, even though relation is not completely understood yet. Many bacterial or viral agents can be responsible of infections with similar symptoms. Thus a fast and early diagnosis is necessary to give to the patient the right and efficient antibiotic treatment. In order to identify some new antigens, we analysed the humoral response of children and adults with a respiratory tract infection and asthmatic children, all diagnosed positive for an acute infection to M. Pneumoniae. In this aim, we developped two proteomic tools coupled to immunological tests. By these experiments, we identified and characterized 47 antigenic proteins expressed during the infection by the bacterium. Five of these 47 antigens were further evaluated to assess their usefulness for serodiagnosis of M. Pneumoniae infection. After cloning of sequences of interest, recombinant proteins were expressed and purified by chromatography. The serological performances with the purified recombinant antigens were then evaluated by in-house ELISAs with a panel of sera of M. Pneumoniae-infected patients, with respiratory tract infection (children and adults) or asthma (children). During our work we identified three antigens for children and two antigens for adults with respiratory infections respectively, and one antigen for M. Pneumoniae-infected asthmatic children, interesting for the serodiagnosis of M. Pneumoniae infection.