Identification et caractérisation de modulateurs allostériques du récepteur GLP-1R

Identification and characterization of allosteric modulators for GLP-1R receptor

• Auteur / Autrice : Flavia Tisserant
• Direction : Frédéric Simonin
• Type : Thèse de doctorat
• Discipline(s) : Aspects moléculaires et cellulaires de la biologie
• Date : Soutenance en 2007
• Etablissement(s) : Université Louis Pasteur (Strasbourg) (1971-2008)

Mots clés

Mots clés contrôlés

Complexes récepteur-ligand

Diabètes -- Thérapeutique

Récepteurs couplés aux protéines G

Allostérie

Résumé

Le récepteur du Glucagon Like Peptide-1 (GLP-1R) appartient aux Récepteurs Couplés aux Protéines G et constitue une cible très prometteuse pour le traitement du diabète et des maladies neurodégénératives chroniques. Afin de découvrir des modulateurs allostériques de GLP-1R, un essai de criblage basé sur le FRET (Fluorescence Resonance Energy Transfer) a été développé. L’identification de tels ligands a été privilégiée en établissant l’essai FRET sur le récepteur orphanisé, c'est-à-dire délété du site de liaison du peptide endogène par suppression de l’extrémité N-terminale. Le criblage a conduit à la sélection de plusieurs composés allostériques se fixant dans le corps central de GLP-1R. Leur caractérisation fonctionnelle a montré qu’ils potentialisaient la réponse du peptide endogène et qu’ils induisaient in vitro une augmentation de la sécrétion d’insuline dans les cellules . Ces nouveaux ligands ouvrent ainsi des perspectives intéressantes pour le traitement du diabète de type 2.

The Glucagon-Like-Peptide-1 Receptor (GLP-1R) belongs to the G protein coupled receptor family and represents a promising target for the treatment of chronic neurodegenerative disorders and diabetes. A screening assay based on Fluorescence Resonance Energy Transfer (FRET) technology was developed to identify a new class of ligands. To look specifically for allosteric modulators, FRET assay was established on the orphanised GLP-1R: the receptor was deleted from its endogenous agonist binding site by truncation of the N-terminal domain. The screening campaign led to the discovery of several allosteric compounds binding the GLP-1R transmembrane region. The functional characterization revealed that some of them act as positive allosteric modulators by enhancing agonist-stimulated responses. These allosteric compounds of GLP-1R also potentiate the insulin release of pancreatic -cells in vitro and therefore offer new perspectives for the treatment of type 2 diabetes.