Etude fonctionnelle des gènes régulés au cours de la différentiation des cellules PC12 induite par le NGF et le PACAP

Functionnal study of genes regulated by NGF and PACAP during PC12 cell differentiation

• Auteur / Autrice : Aurélia Ravni
• Direction : David Vaudry
• Type : Thèse de doctorat
• Discipline(s) : Biologie cellulaire. Neurosciences
• Date : Soutenance en 2007
• Etablissement(s) : Rouen

Mots clés

Mots clés contrôlés

Neuropeptides

Neurotrophines

Différenciation cellulaire

Mots clés libres

Ngf

Pacap

Cellule PC12

Neuritogénèse

Résumé

Dans les cellules PC12, le NGF et le PACAP excercent des effets neurotrophiques qui se manifestent par l’apparition de neurites, une augmentation du volume, un arrêt de la prolifération et une diminution de la mort cellulaire. L’étude des voies de transduction révèle que la neuritogénèse est indépendante de la PKA mais requiert la production d’AMPc et la phosphorylation de ERK. Notre but était de caractériser de nouveaux mécanismes moléculaires impliqués dans la différentiation. Les puces à ADN ont permis d'identifier les gènes induits par le NGF, le PACAP et l’AMPc puis de rechercher ceux dont la stimulation dépend de ERK mais non de la PKA. L’utilisation des siRNA a ensuite montré que la villine 2 est impliquée dans l’augmentation du volume cellulaire alors que Egrl contrôle la neuritogenèse sans modifier la prolifération des cellules. La serpine b1a participe à l’effet neuroprotecteur du NGF et du PACAP en diminuant l’activité de la caspase-3 et en augmentant la survie des PC12.

In PC12 cells, NGF and PACAP exert neurotrophic effects which are materialized by neurite outgrowth, cell size increase, growth arrest and reduction of cell death. The study of transduction pathways has revealed that neuritogenesis does not depend on PKA activation but requires cAMP. Then, we have looked for genes whose stimulation depends on ERK phosphorylation but does not require PKA activation. SiRNA showed that villin 2 is implicated in the regulation of cell size increase whereas Egrl controls neuritogenenesis without affecting growth arrest. Serpin b 1a is involved in the neuroprotective effect of NGF and PACAP by decreasing caspase-3 activity and increasing PC12 cell survival.