Des xénopes transgéniques pour l’étude de la neurogénèse : analyse et propriétés fonctionnelles de neuroblastes exprimant un gène rapporteur sous contrôle du promoteur de NeuroD

Transgenic xenopus to study neurogenesis : analysis and functional properties of neuroblasts expressing a reporter gene under the control of the neuroD prometer

• Auteur / Autrice : Anne L'Hostis-Guidet
• Direction : Daniel Boujard, François Tiaho
• Type : Thèse de doctorat
• Discipline(s) : Biologie
• Date : Soutenance en 2007
• Etablissement(s) : Rennes 1

Mots clés

Mots clés contrôlés

Imagerie en biologie

Canaux calciques

Transgénose

Cellules souches neurales

Xénopes

Résumé

L’activité électrique impliquée dans la neurogenèse au cours du développement embryonnaire chez les vertébrés est sous le contrôle de perméabilités calciques dont la caractérisation nécessite de pouvoir repérer les neuroblastes. Des lignées transgéniques exprimant la protéine EGFP sous contrôle de promoteurs de facteur de différenciation neuronale (NeuroD) ou de marqueur neuronal (Neuro β-tubuline) ont été produites chez l’amphibien Xenopus laevis. Chez ces animaux, l’expression du transgène est restreinte aux neurones et à des cellules indifférenciées du système nerveux. Des analyses par imagerie calcique en microscopie confocale suggèrent que les cellules exprimant l'EGFP sous contrôle du promoteur de NeuroD ont des propriétés fonctionnelles différentes des cellules ne l'exprimant pas. La combinaison de la transgenèse et de l'imagerie fonctionnelle permet d'envisager d’étudier et de caractériser les neuroblastes exprimant le facteur bHLH NeuroD.

Electrical activity involved in neurogenesis during embryonic development of vertebrates is dependant of calcium permeabilities whose characterization requires the ability to locate neuroblasts. Transgenic lines expressing EGFP under the control of the NeuroD (neuronal differentiation factor) and the Neuro β-tubulin (neuronal marker) promoters were produced in Xenopus laevis. The transgene expression is restricted to neurons and non differentiated cells exclusively in nervous system in these transgenic animals. Confocal calcium imaging suggests that EGFP expressing cells with the NeuroD promoter would have different functional properties compared to cells without transgene expression. The combination of transgenesis and functional cellular imaging is a promising tool for characterization of neuroblasts expressing bHLH NeuroD factor.