Etude de facteurs cellulaires impliqués dans les étapes précoses du cycle de réplication du VIH-1

Study of cellular factors involved in the early steps of hiv-1 replication cycle

• Auteur / Autrice : Julie Lemay
• Direction : Richard Benarous
• Type : Thèse de doctorat
• Discipline(s) : Microbiologie et virologie
• Date : Soutenance en 2007
• Etablissement(s) : Paris 7

Mots clés

Mots clés contrôlés

Transcriptase inverse du VIH

Récepteurs CCR5

Génome viral

Réplication virale

génétique

VIH-1 (Virus de l'Immunodéficience Humaine de type 1)

Résumé

Les étapes précoces du cycle de réplication du VIH-1 sont les étapes les moins bien caractérisées. Ces étapes incluent la fusion membranaire, la décapsidation, la reverse transcription, l'import nucléaire et l'intégration. Les travaux de recherche décrits dans cet ouvrage concernent deux de ces étapes, soit la fusion et la reverse transcription. La première section porte sur l'oligomérisation du récepteur CCR5 et son importance pour l'entrée du VIH-1 dans les cellules cibles. La deuxième section porte sur l'identification de deux partenaires cellulaires de la reverse transcriptase (RT) du VIH-1. HuR est la première protéine cellulaire à avoir été caractérisée comme interagissant avec la RT. Cette protéine nucléaire est impliquée dans la stabilisation de certains ARNm. La deuxième protéine cellulaire caractérisée est AKAP149, une protéine membranaire qui ancre la PKA au niveau des membranes mitochondriales et nucléaires. Nous avons caractérisé l'interaction de la RT avec ces deux protéines par des techniques in vitro et in vivo. Grâce à l'utilisation de l'ARN interférence, nous avons montré que l'absence de ces deux protéines affectaient la réplication du VIH-1 et la reverse transcription in vivo. Dans l'ensemble, nos résultats suggèrent que HuR et AKAP149 soient impliqués au cours des étapes pré-intégration. Les mécanismes par lesquels ces deux protéines modulent la reverse transcription demeurent à être élucidés.

The early steps of the HIV-1 replication cycle are still poorly understood. These steps include membranes fusion, uncoating, reverse transcription, nuclear import and integration. The works described in this manuscript concern about two of these steps: fusion and reverse transcription. The first part is treating about the oligomerisation of the CCR5 receptor, and its importance for HIV-1 entry into cells. The second part is about the identification of two cellular partners of HIV-1 reverse transcriptase (RT). HuR is the first cellular protein to be characterised has being an interactant of RT. This nuclear protein is involved in the stabilisation of some mRNAs. The second cellular protein we caracterised is AKAP149, a membrane protein that anchors PKA to mitochondrial and nuclear membranes. We characterised the interaction between RT and these two proteins, by both in vitro and in vivo experiments. With the use of RNA interference, we showed that the absence of both proteins was impairing HIV-1 replication, particularly at the level of the reverse transcription. Taken together, these results suggest that HuR and AKAP149 could be involved in the pre-integration steps of the viral replication cycle. The mechanisms by which these two proteins modulate the reverse transcription reaction still remain to be elucidated.