Etude des stades précoces du cycle réplicatif du virus de l'hépathite C dans les hépatocytes

Study of the early stages of hepatitis C virus replication cycle into hepatocytes

• Auteur / Autrice : Claire Bertaux
• Direction : Uriel Hazan
• Type : Thèse de doctorat
• Discipline(s) : Microbiologie. Virologie
• Date : Soutenance en 2007
• Etablissement(s) : Paris 7

Mots clés

Mots clés contrôlés

Protéines de l'enveloppe virale

Virion

Pénétration virale

Endocytose

Antigènes CD

Hepacivirus

Résumé

Le virus de l'hépatite C (VHC) est un pathogène majeur causant des cancers du foie. Ce n'est que plus de dix ans après sa découverte que des systèmes expérimentaux in vitro ont été développé et ont permis de montrer que le tropisme du virus pour les hépatocytes est restreint par l'interaction des glycoprotéines d'enveloppe E1E2 avec des récepteurs de surface cellulaire. Les détails de cette étape et le mécanisme conduisant à l'internalisation du VHC ont longtemps été ignorés. Mon travail de thèse c'est focalisé sur l'étude de ces stades précoces du cycle viral, des cibles privilégiées pour le développement d'un vaccin. Nos travaux ont mis en évidence que la grande boucle extracellulaire du corécepteur CD81 est importante pour l'attachement des particules. Cette étape est suivie de l'intervention de molécules recrutées au sein du complexe virus-récepteurs par les domaines transmembranaires et intracellulaires de CD81 afin d'initier l'internalisation des VHCpp. Nous avons également découvert que les claudines, protéines des jonctions serrées, sont des cofacteurs nécessaire à l'entrée du VHC. Enfin, nous avons démontré que le VHC est endocyté par la voie de la clathrine et nécessite un passage par les endosomes précoces mais non tardifs. Une étude détaillée des cinétiques d'entrée des VHCpp a montré que la fusion du virus dépendante du pH requière d'autres événements au cours du trafic intracellulaire. Ces découvertes ont permis d'établir que le mécanisme d'entrée du VHC est complexe et nouveau. Elles ouvrent de nouvelles perspectives pour développer des stratégies thérapeutiques ciblant des étapes spécifiques de l'infection.

Hepatitis C virus (HCV) is a major human pathogen causing hepatocellular carcinoma. It took more than ten years after its discovery to develop in vitro Systems to allow the study of HCV entry. These models have allowed determining that HCV tropism for hepatocytes is restricted by the interaction between the envelope glycoproteins E1E2 and specific cell surface receptors. However, the details concerning this step and the mechanism that entails HCV internalization have been ignored for a long time. My thesis work was focused on these early stages of the virus cycle that represent privileged targets for the development of a vaccine. We elucidate that the large extracellular loop of CD81, an HCV coreceptor, is important for attachment to target cell. This step is followed by recruitment of molecules into the virus-receptors complex by the transmembrane and intracellular domains of CD81 in order to initiate internalization. We also discovered that claudins, tight junction proteins, are cofactors required for HCV entry. Finally, our group was one of the first to demonstrate that HCV is endocytosed via the clathrin pathway and is delivered to early but not late endosomes. A detailed study of HCVpp entry kinetics showed that pH dependant-viral fusion required additional events during intracellular trafficking. These important findings permit to establish that the mechanism of HCV entry is complex and novel. It opens new perspectives to develop new therapeutic strategies targeting specific steps of infection.