Morphogenèse du virus de l'hépatite C : rôle du clivage de la protéine de capside par la signal -peptide-peptidase

Hepatitis C virus morphogenesis : role of catalyzed clivage of core protein by signal peptide peptidase

• Auteur / Autrice : Christelle Vauloup-Fellous
• Direction : Arielle Rosenberg
• Type : Thèse de doctorat
• Discipline(s) : Virologie médicale
• Date : Soutenance en 2007
• Etablissement(s) : Paris 6

Mots clés

Mots clés libres

Virus de l'hépatite C [VHC]

Protéine de capside

Signal-peptide-peptidase [SPP]

Morphogenèse du VHC

Résumé

La capside du virus de l’hépatite C (VHC) semble constituée par la forme mature de la protéine de capside (protéine C), la p21. Sa forme immature, la p23, est libérée de la polyprotéine par clivage par la signal peptidase (SP). La p21 est issue du clivage intramembranaire de la p23, par la signal peptide peptidase (SPP). Nous avons étudié le rôle du clivage de la protéine C par la SPP au cours de la morphogenèse virale grâce à 2 systèmes expérimentaux : l’un permettant de visualiser des pseudo-particules de VHC bourgeonnant dans le RE grâce à un vecteur basé sur les propriétés de réplication du virus de la forêt de Semliki, et l’autre permettant de produire des pseudo-particules de VHC, basé sur l'infection de cellules d’insecte par des baculovirus recombinants contenant la portion d’ADNc codant les protéines structurales du VHC. L’inhibition de la SPP a été obtenue grâce à un inhibiteur pharmacologique et/ou grâce à l’introduction de mutations au sein du domaine transmembranaire de la protéine C. Les stabilité respectives des capsides formées de p21 et de p23 ont été analysées. Les expérimentations ont montré que l’inhibition du clivage de la p23 en p21 n’empêchait pas le bourgeonnement mais semblait au contraire le favoriser, et que les capsides composées de p21 seraient moins stables que celles formées de p23. Nous avons ensuite montré que le clivage de la protéine C par la SP était un pré-requis à son clivage par la SPP. L’ensemble de ces résultats conduit à proposer un modèle pour le bourgeonnement du VHC dans lequel la p23, serait la forme de protéine C vouée à l’assemblage des capsides tandis que la p21, serait vouée au désassemblage de la capside.