Caractérisation fonctionnelle de l'autolysine AtlA de Enterococcus faecalis et identification des facteurs modulant son activité enzymatique

Functionnal characterization of Enterococcus faecalis autolysin AtlA and identification of the factors modulating its enzymatic activity

• Auteur / Autrice : Catherine Eckert
• Direction : Laurent Gutmann
• Type : Thèse de doctorat
• Discipline(s) : Microbiologie
• Date : Soutenance en 2007
• Etablissement(s) : Paris 6

Mots clés

Mots clés libres

Enterococcus faecalis

Autolysine

N-acétylglucosaminidase

LysM

Acétylation

Glycosylation

Résumé

Les bactéries synthétisent des hydrolases du peptidoglycane (PG), ou autolysines, dont l’activité doit être finement régulée. Chez Enterococcus faecalis, une seule autolysine (AtlA) a été décrite. Nous avons purifié AtlA et analysé les produits de digestion du PG par cette enzyme : AtlA est une N-acétylglucosaminidase. La présence du domaine N-terminal de AtlA n’a pas d’impact sur son activité enzymatique, celle du domaine LysM permettant la fixation au PG est cruciale pour l’activité. Nous avons purifié la protéine AtlA produite par E. Faecalis, quatre polypeptides majeurs ont été identifiés : la protéine mature, deux formes glycosylées et la protéine tronquée de son domaine N-terminal. Nous avons également initié une étude comparative de la susceptibilité de différentes souches de E. Faecalis à l’enzyme AtlA. La caractérisation du mutant oatA confirme que ce gène est responsable de l’O-acétylation du PG. L’absence de l’O-acétylation du PG chez le mutant oatA se traduit par une plus grande susceptibilité à l’enzyme AtlA. Ce résultat confirme que cette modification est un des mécanismes qui permettent à la bactérie de contrôler les activités autolytiques.