Influence de la protéine SPARC sur le mélanocyte au cours du processus de transformation tumorale

Influence of secreted protein SPARC during malignant transformation of melanocyte cells

• Auteur / Autrice : Guillaume Robert
• Direction : Sophie Tartare-Deckert
• Type : Thèse de doctorat
• Discipline(s) : Aspects moléculaires et cellulaires de la biologie
• Date : Soutenance en 2007
• Etablissement(s) : Nice
• Ecole(s) doctorale(s) : École doctorale Sciences de la vie et de la santé (Sophia Antipolis, Alpes-Maritimes)

Mots clés

Mots clés contrôlés

Facteurs de transcription

Mélanoblastome

Mélanocytes

Mots clés libres

Sparc

Cadhérine E

Snail

Résumé

Au sein de l’épiderme les mélanocytes sont des cellules responsables de la synthèse de pigment mélanique. Le mélanome issu de la transformation maligne des mélanocytes est une tumeur agressive à fort potentiel invasif et résistant à toutes les thérapies anticancéreuses existantes. Le but de ce travail de thèse était de mieux comprendre les mécanismes moléculaires impliqués dans la transformation du mélanocyte en mélanome. Notre équipe s’est intéressée au rôle d’une protéine fortement exprimée lors de la transformation du mélanocyte sain en mélanome, la protéine matricielle SPARC (Secret Protein Acide And Rich in Cysteine). Nos résultats montrent que l’expression de SPARC dans les mélanocytes humains normaux conduit à la répression de cadhérine E qui est une protéine importante pour l’homéostasie du mélanocyte et à une transition mésenchymateuse. Le mécanisme de régulation implique l’augmentation de l’expression du facteur de transcription Snail. Dans un second temps, nous avons montré que la déplétion de SPARC par interférence à l’ARN conduisait à une réinduction de la cadhérine et une diminution de Snail et inhibait in vitro les propriétés invasives des mélanomes A375. Nous avons pu également mettre en évidence une diminution de la croissance cellulaire et de la clonogénicité et une augmentation de l’inhibiteur de cycle cellulaire p21CIP1 lors de l’abolition de l’expression de SPARC dans les mélanomes, confirmant son importance dans le processus de croissance tumorale. En conclusion, la protéine SPARC apparaît comme un facteur déterminant pour la mise en place et le maintien d’un phénotype transformé dans les cellules mélanocytaires.

In the epidermis, melanocytes are highly differentiated cells involved in melanin pigment synthesis. Melanoma is aggressive tumor that arises from the malignant transformation of melanocytes. It has a high capacity of invasion and notoriously resistant to existing antitumor therapies. The aim of our work was to better understand the molecule mechanisms involved in melanoma transformation. Our team has focused its efforts on the role of SPARC (Secreted Protein Acidic And Rich in Cysteine), a matrix-associated protein described as markedly increased in human melanomas company to melanocytes. Our results showed that SPARC overexpression in human melanocytes leads to a mesenchymal transformation through up regulation of the transcription factor Snail and repression of E-cadherin, an important protein for melanocytes homeostasis. Consistently, in the second part of the study we showed that depletion of SPARC expression in human A375 melanoma cells by RNAi leads to reinduction of E-Cadherin level, a down regulation in Snail expression and resulted in a significant decrease in invasive properties. We also observed a reduction in cell proliferation, anchorage-independent growth properties and a strong increase of cell cycle inhibitor p21CIP1 in SPAR-depleted melanoma cells, confirming the importance of SPARC in tumor cell growth process. To conclude, our work supports a critical role of SPARC in the establishment and maintenance of the transformed phenotype of melanoma cells.