Recherche Avancée

Thèse soutenue

Identification et caractérisation de partenaires de la protéine SPO11 chez la souris

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Auteur / Autrice : Katia Bouton
Direction : Bernard de Massy
Type : Thèse de doctorat
Discipline(s) : Endocrinologie moléculaire et cellulaire. Biochimie, biologie cellulaire et moléculaire
Date : Soutenance en 2007
Etablissement(s) : Montpellier 1
Partenaire(s) de recherche : autre partenaire : Université de Montpellier I. Faculté de médecine (1896-2014)

Résumé

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La protéine SPO11 est codée par un gène uniquement exprimé en méiose, et indispensable pour la ségrégation réductionnelle des chromosomes en première division de méiose et donc pour la fertilité. SPO11 catalyse la formation de Cassures Double-Brin (CDB) de l'ADN qui initient les événements de recombinaison méiotique. Chez S. Cerevisisiae, cette étape de CDB requiert neuf autres protéines. Contrairement à SPO11 qui est très conservée chez tous les eucaryotes, les autres protéines impliquées spécifiquement dans la formation des CDB chez S. Cerevisiae n'ont pas d'orthologues identifiés à ce jour. Mon projet de thèse a consisté à identifier et analyser des partenaires de SPO11 chez la souris. Par différentes méthodes, en particulier avec la mise en oeuvre de cribles double-hybride dans la levure, nous avons obtenu deux partenaires potentiels de SPO11 : MEI1 et SAAL1. Dans cette étude, l'interaction de SPO11 avec ces deux partenaires a été confirmée grâce à différentes méthodes : à partir de protéines traduites in vitro, in cellulo par transfection de cellules et in vivo par co-précipitation. De plus, nous avons pu montrer que MEI1 et SAAL1 interagissent, ce qui nous permet de proposer que ces trois protéines interagissent dans un même complexe. Dans un deuxième temps, nous avons cherché à caractériser ces différents partenaires : étude de l'expression du gène et localisation de la protéine. Une analyse bio-informatique de SAAL1 et MEI1 a révélé que ces deux protéines possèdent une similitude de structure avec les importines nous permettant d'émettre l'hypothèse que ces deux protéines interviendraient pour la localisation cellulaire de SPO11 dans les cellules méiotiques.