Phosphorylation des protéines chez staphylococcus aureus : étude d’une activité sérine/thréonine kinase

Protein phosphorylation in staphylococcus aureus : analyze of a serine/threonine kinase activity

• Auteur / Autrice : Rodrigo Lomas López
• Direction : Bertrand Duclos
• Type : Thèse de doctorat
• Discipline(s) : Biochimie
• Date : Soutenance en 2007
• Etablissement(s) : Lyon 1

Mots clés

Mots clés contrôlés

Staphylocoque doré

Phosphorylation

Résumé

Ce travail s’inscrit dans le cadre général de l’étude de la phosphorylation des protéines sur la sérine et la thréonine chez la bactérie à Gram-positif Staphylococcus aureus. Tout d’abord, nous avons mis en évidence la présence de deux gènes, SA1062 et SA1063, codant pour deux enzymes responsables de deux activités antagonistes, une protéine-sérine/thréonine kinase StkSA1, et une phosphosérine/thréonine phosphatase StpSA1. StkSA1 a été identifiée comme un substrat endogène de StpSA1. Nous avons ensuite caractérisé cinq sites d’autophosphorylation de StkSA1. Ainsi, deux thréonines proches du site actif sont essentielles à l’activité kinase de StkSA1, alors que trois autres ne montrent aucun effet dans la régulation de l’activité kinase de StkSA1. Enfin, nous avons identifié, in vivo et in vitro, dix protéines qui se sont révélées être des substrats de StkSA1. La plupart de ces protéines sont impliqués dans le métabolisme bactérien, et notamment la glycolyse

We have studied the phosphorylation of proteins on serine and threonine in Staphylococcus aureus. First, we have shown that a pair of genes, SA1062 and SA1063, encodes respectively two enzymes with opposing activities, a protein-serine/threonine kinase StkSA1, and a phosphoserine/threonine phosphatase StpSA1. StkSA1 appears to be an endogenous substrate for StpSA1. We have also identified five phosphorylated threonine residues in StkSA1. Two threonine residues of the activation loop are essential for the kinase activity of StkSA1. The other three identified residues seem not to have any role in the regulation of the catalytic activity of StkSA1. Finally we have detected and identified by both in vivo and in vitro approach 10 different proteins that are phosphorylated by endogenous serine/threonine kinase. Most of these phosphoproteins are enzymes involved in the cell central metabolisme parthway, namely glycolysis