Conséquences moléculaires des mutations germinales sur l’expression des gènes de prédisposition au cancer du sein

Molecular consequences of mutations on the expression of breast cancer predisposing genes

• Auteur / Autrice : Olga Anczukow-Camarda
• Direction : Sylvie Mazoyer
• Type : Thèse de doctorat
• Discipline(s) : Biologie moléculaire
• Date : Soutenance en 2007
• Etablissement(s) : Lyon 1

Mots clés

Mots clés contrôlés

Épissage (génétique)

Protéine BRCA1

Prédisposition (médecine)

Cancer du sein

Expression génique

Mutation (biologie)

Cellules germinales

Résumé

Les mutations germinales du gène BRCA1 prédisposent au cancer du sein et de l’ovaire. La majorité d’entre elles introduisent un codon de terminaison de la traduction prématuré (PTC) dans la séquence codante et les transcrits BRCA1 mutés sont généralement dégradés par la voie de dégradation spécifique des ARNm porteurs de PTCs appelée NMD (Nonsense-Mediated Decay). Nous avons utilisé un minigène comportant l’exon 11 de BRCA1 (3,4 kb) comme modèle pour étudier le rôle des introns et de la région 3’UTR dans le déclenchement du NMD. Par ailleurs, nous avons montré que des mutations situées en 5’ du gène échappent au NMD en entraînant la réiniation de la traduction. Nous avons également analysé l’expression protéique d’allèles porteurs de PTCs dans le cas des gènes de prédisposition au cancer du sein BRCA1, CHEK2 et TP53. Finalement, nous avons recherché les conséquences sur l’épissage d’une grande série de variants non classés identifiés dans l’exon 11 de BRCA1 par les centres de diagnostic moléculaire français.

Germ-line mutations in the BRCA1 gene predispose women to breast and ovarian cancer. Most of them introduce a premature termination codon (PTC) and the resulting BRCA1 transcripts carrying a PTC are degraded by a specific pathway called Nonsense-Mediated mRNA Decay (NMD). We have used a minigene containing BRCA1 exon 11 (3. 4 kb) to study the role of the introns and the 3’UTR region in NMD. Furthermore, we have shown that mutations located at the 5’ end of the gene escape NMD by triggering translation reinitation. We have also analyzed the expression of truncated proteins from PTC containing alleles of breast cancer predisposing genes (BRCA1, CHEK2 and TP53). Finally, we have assessed the consequences on splicing of 108 unclassified variants identified in BRCA1 exon 11 by French molecular diagnosis centers