Analyse moléculaire de la voie de signalisation Notch : coupure gamma-secrétase et acétylation du récepteur
Auteur / Autrice : | Annie Olry |
Direction : | Christel Brou |
Type : | Thèse de doctorat |
Discipline(s) : | Biologie moléculaire et cellulaire du développement |
Date : | Soutenance en 2006 |
Etablissement(s) : | Paris 7 |
Mots clés
Résumé
La voie de signalisation Notch est initiée par un contact intercellulaire impliquant l'interaction entre le récepteur et un de ses ligands. Il en résulte une coupure extracellulaire du récepteur, suivie du clivage dans le domaine transmembranaire par le complexe gamma-secrétase. Le domaine intracellulaire de Notch est alors libéré de la membrane plasmique et transporté dans le noyau où il participe à l'activation de la transcription des gènes cibles de la voie. Le complexe gamma-secrétase est formé de quatre protéines transmembranaires : Préséniline, Nicastrine, Aph-1 et Pen-2. Grâce à un crible génétique en cellules mammifères, nous avons identifié une mutation ponctuelle dans le domaine extracellulaire de la Nicastrine abolissant le clivage membranaire de Notch. L'analyse de la protéine mutante nous a permis d'étudier la formation du complexe gamma-secrétase. L'interaction entre une forme immature de la Nicastrine et Aph-1 dans le réticulum endoplasmique constitue la première étape d'assemblage. La progression de ce complexe intermédiaire vers l'appareil de Golgi semble dépendre de la conformation de la Nicastrine. D'autre part, nous avons également montré que Notch est monoubiquitiné et internalisé préalablement à son clivage par le complexe gamma-secrétase. Dans le noyau, Notch participe à l'activation de ses gènes cibles, grâce notamment au recrutement de cofacteurs. Parmi eux, les acétyltransférases pSOO/CBP et PCAF régulent positivement l'activation transcriptionnelle des gènes cibles. Nos travaux suggèrent que le récepteur Notch est acétylé par p300/CBP sur des résidus lysines déterminés.