Etudes des étapes précoces de l'infection des virus foamy

Early steps of fomay virus infection

• Auteur / Autrice : Jacqueline Lehmann-Che
• Direction : Ali Saïb
• Type : Thèse de doctorat
• Discipline(s) : Thérapeutiques biotechnologiques
• Date : Soutenance en 2006
• Etablissement(s) : Paris 7

Mots clés

Mots clés contrôlés

Phase G0

Réplication virale

Spumavirus

Protéines virales

Rétroviridés

Résumé

Dans le cycle réplicatif des rétrovirus, les étapes tardives de l'infection ont été élucidées ces dernières années alors que les étapes précoces, allant de l'entrée du virus jusqu'à l'intégration du génome dans celui de la cellule hôte, restent encore peu connues. Par le présent travail, nous avons tenté de répondre à un certain nombre de questions concernant ces étapes cruciales en prenant les rétrovirus foamv comme modèle. A l'aide d'un virus mutant pour la protéase virale, nous avons impliqué pour la première fois, cette enzyme dans le processus de décapsidation d'un rétrovirus. Ainsi la protéase assure le clivage des protéines Gag du core viral entraînant sa déstructuration et l'exposition en surface des signaux de localisation nucléaire permettant un import nucléaire du complexe de préintégration. Dans un modèle de cellules arrêtées en phase GO du cycle cellulaire, nous avons mis en évidence que l'absence de déshabillage des particules virales rend compte du défaut réplicatif dans ces cellules. Il semble que l'étape de décapsidation puisse être une étape limitante à l'origine de l'inefficacité de l'infection dans les cellules quiescentes. Nous avons également identifié une séquence dans Gag responsable d'un ancrage du PIC au chromosome de la cellule infectée qui peut être impliquée dans le maintien et/ou le ciblage de l'intégration. La compréhension précise de ces étapes semble indispensable à l'amélioration des vecteurs de transfert de gène appliqués aux cellules quiescentes et post-mitotigues mais également à la maîtrise de l'intégration rétrovirale dans le génome hôte conduisant à l'utilisation raisonnée des rétrovirus en tant gué vecteurs de transfert de gène.

Although retroviral egress and buddinq have been partly unraveled little is known on earlv stages of the replication cycle. In particular, retroviral uncoating a process during which incoming retroviral cores are progressively modified to allow integration of the viral genome into host chromosomes is poorly understood. To get insights into these early events of the retroviral cycle, foamy viruses (FVs) were used as a model. In the present work, we provide strong evidence that FV uncoating depends on the proteolytic activity of the viral protease. A protease-defective virus is still able to bud efficiently, to enter thé target œil, and to reach the centrosome (IWTOC) but remain noninfectious. In the mutant virus, uncoating is altered and leads to the accumulation of uncoated capsids at the centrosome. Interestingly, a similar situation was observed following infection of resting cells by wild-type virus. Therefore, virus uncoating. Likely involving the viral protease, is the limiting stage in such cells. Finally, we also identified a stretch of basic 13 amino-acids in the structural Gag protein displaying efficient chromosome tethering properties, contrlbuting to integration site specificitv or/and maintenance of unintegrated DMA genome during mitosis. Understanding precisely these early stages is essentiel to discover new therapeutic approaches and to generate efficient and safer therapeutic vectors for gene therapy.