Mécanismes d'interaction des vecteurs adénoviraux avec la muqueuse intestinale et conséquences pour la vaccination orale

Interaction mechanisms between adenoviral vectors and the intestinal mucosa and consequences for oral vaccination

• Auteur / Autrice : Sylvie Lecollinet
• Direction : Jennifer Richardson
• Type : Thèse de doctorat
• Discipline(s) : Microbiologie. Virologie
• Date : Soutenance en 2006
• Etablissement(s) : Paris 7

Mots clés

Mots clés contrôlés

Vaccination

Récepteurs viraux

Muqueuse intestinale

Animaux

Adenoviridae

Adénoviridés

Résumé

Afin d'optimiser les vecteurs adénoviraux (Ad) pour une immunisation orale, nous avons souhaité caractériser lesT interactions des Ad avec la muqueuse intestinale et leurs conséquences sur l'induction de réponses immunitaires (RI). L'efficacité des Ad conventionnels dérivés du sérotype 5 (Ad5) pourrait être limitée par une faible disponibilité de leurs récepteurs au pôle apical de l'épithélium. Nous avons comparé le comportement de vecteurs dérivés d'AdS pseudotypés avec les fibres d'autres sérotypes humains, utilisant des récepteurs différents, dans des cultures d'épithélium intestinal différencié. Les vecteurs portant les fibres de certains Ad des sous-groupes B et D ont transduit l'épithélium humain depuis le pôle apical bien plus efficacement que l'AdS, en liaison avec leur capacité à s'attacher sur CD46 ou des sialoconjugués. Les Ad testés ont induit chez la souris C57B1/6 la production d'IgA intestinales, dont la cinétique et l'amplitude différaient fortement même pour des Ad partageant des récepteurs identiques. L'efficacité d'immunisation ne semble donc pas refléter la capacité de franchissement de l'épithélium in vitro. L'analyse de la distribution des transcrits viraux a cependant montré une bonne corrélation entre efficacité de transduction de l'intestin in vivo et in vitro. De plus, des réponses immunitaires identiques ont pu être observées entre des souris sauvages ou transgéniques pour le CD46 humain après administration d'un Ad portant une fibre CD46-dépendante. Au final, ces études suggèrent que l'interaction de la fibre avec son récepteur sur les cellules épithéliales ne constitue pas une étape limitant l'induction des RI après administration orale des Ad.

In an effort to optimise adenoviral vectors (Ad) for oral vaccination, we wish to characterise the interactions between Ad and intestinal mucosa and their consequences for the induction of immune responses (IR). The efficacy of conventional Ad derived from serotype 5 (Ad5) could be limited by the low availability of their receptors at the apical pole of epithelia. We have compared the behaviour of vectors derived from Ad5 and pseudotyped with the fibers of different human serotypes, known to use diverse receptors, in culture models of differentiated intestinal epithelium. Vectors bearing the fibers of certain Ad of subgroups B and D transduced human epithelium from the apical pole much more efficiently than Ad5, in relation to their capacity to use CD46 or sialoconjugates for attachaient. Upon intragastric (ig) immunisation of C57B1/6 mice, the tested vectors consistently elicited intestinal IgA secretion, whose kinetics and amplitude substantially differed even for Ad that used identical receptors. Thus vaccinal efficiency did not appear to mirror capacity to breach the epithelial barrier in vitro. However, analysis of intestinal expression of viral transcripts evidenced a good correlation between in vitro and in vivo intestinal transduction efficacies. Moreover, identical IR were detected in wildtype and human CD46 transgenic mice after ig administration of an Ad bearing a CD46-dependent fiber. When taken together, these studies suggest that the interaction between fiber and its cognate receptor on epithelial cells does not constitute a limiting step for induction of IR after oral administration of Ad.