Electrotransfert pour la thérapie génique : amélioration de l'efficacité et de la biosécurité pour le traitement de l'anémie

Intramuscular electrotransfer for gene therapy : efficiency and biosafety optimisation for anemia treatment

• Auteur / Autrice : Emmanuelle Fabre
• Direction : Daniel Scherman
• Type : Thèse de doctorat
• Discipline(s) : Thérapeutiques biotechnologiques
• Date : Soutenance en 2006
• Etablissement(s) : Paris 7

Mots clés

Mots clés contrôlés

Érythropoïétine

MM Creatine Kinase

Électrochimiothérapie

Électroporation

Anémie rénale

Acétylcholinestérase

Thérapie génique

Résumé

Les études menées dans le cadre de l'électrotransfert musculaire afin d'améliorer l'efficacité et la sécurité des applications de thérapie génique, ont abouti aux conclusions suivantes : (1) L'introduction d'un intron dans les cassettes d'expression influence modérément leur efficacité. L'emploi de promoteurs dérivés de celui de la créatine kinase musculaire parait prometteur puisqu'ils possèdent une efficacité presque équivalente à celle du promoteur du cytomégalovirus et une spécificité musculaire d'expression. (2) Un système de régulation transcriptionnelle non-toxique pourrait être créé à partir du promoteur du gène de la métallothionéine 1 dont l'expression musculaire est induite par l'aspirine. L'efficacité de ce système déterminera son intérêt. (3) L'électrotransfert répété de faibles doses de plasmide-érythropoïétine permet d'obtenir un traitement efficace, non-toxique et durable de l'anémie des souris bêta-thalassémiques ; L'ingestion d'adénine peut générer un modèle pertinent d'insuffisance rénale chronique chez le chat dont l'anémie peut être traitée efficacement par électrotransfert de plasmide-érythropoïétine. Une optimisation posologique est nécessaire à la bonne tolérance de ce traitement d'intérêt.

Studies managed within the scope of muscular electrotransfer to improve efficiency and safety of gene therapy applications led to present conclusions: (1) Intron association to cytomegalovirus promoter slightly influences expression cassette efficiency. Use of muscular creatin kinase promoter variant seems promising for non-vaccinal muscular applications as their efficiency almost reach than that of cytomegalovirus promoter and as they provide muscular specificity of expression. (2) Aspirin induces muscular expression of metallothionein 1 gene. Study of the non-toxic transcriptional regulation System associating this promoter to aspirin will determine ils efficiency and therefore its relevance. (3) Repeated electrotransfer of light erythropoitein-plasmid doses leads to long-lasting efficient and non-toxic treatment of b-thalassemic mice anemia ; Adenin ingestion can provide a relevant chronic renal failure model in cat for which erythropoitein-plasmid electrotransfer can efficiently treat anemia. Further dosage optimisation is required for this significant treatment tolerance.