Bases moléculaires de la différenciation adipocytaire : évaluation de la fonction de la protéine tyrosine phosphatase Ptprv et de la voie de signalisation Hedgehog

Molecular basis of adipocyte differentiaion : evaluation of the function of the protein tyrosine phosphatase Ptrv and the Hedgehog signaling pathway

• Auteur / Autrice : Wendy Cousin
• Direction : Pascal Peraldi
• Type : Thèse de doctorat
• Discipline(s) : Biologie cellulaire et moléculaire
• Date : Soutenance en 2006
• Etablissement(s) : Nice
• Ecole(s) doctorale(s) : École doctorale Sciences de la vie et de la santé (Nice ; 1992-....)

Mots clés

Mots clés contrôlés

Transduction du signal cellulaire

Cellules souches

Tyrosine phosphatase

Différenciation (biologie)

Adipocytes

Mots clés libres

Pseudogène

Cyclopamine

Résumé

L’existence d’un précurseur mésenchymateux capable de se différencier en adipocyte ou ostéoblaste a été mise en évidence chez le rongeur comme chez l’homme. Cela présente un intérêt majeur sachant qu’une dérégulation de la différenciation adipocytaire conduit à l’apparition de syndromes tels que l’obésité ou la lipodystrophie. Les voies de signalisation régulant la différenciation ostéoblastique étant souvent impliquées dans la différenciation adipocytaire, nous avons choisi des gènes connus pour moduler l’ostéogenèse et évalué leur rôle dans la différenciation adipocytaire. Les premiers travaux ont consisté en l’étude de la protéine tyrosine phosphatase (PTP) membranaire Ptprv, impliquée dans l’ostéogenèse, au cours de la différenciation adipocytaire. Nous avons montré que Ptprv est exprimé dans la fraction stroma vasculaire du tissu adipeux et que sa transcription diminue au cours de la différenciation adipocytaire mais qu’elle n’est pas nécessaire à l’adipogenèse (article I). En parallèle à cette étude, nous avons entrepris le clonage de l’orthologue humain de Ptprv. Nous avons isolé un transcrit de 4kb par RT-PCR. Dans cette étude, nous avons mis en évidence la seule PTP dont la fonction a été perdue lors de l’évolution de la souris à l’homme (article II). Enfin, nous avons étudié la voie de signalisation Hedgehog, connue pour promouvoir la formation d’os. L’effet antiadipogénique de cette voie était déjà décrit. Nous avons montre i) qu’il existe une activité basale dans les préadipocytes ii) que cette activité diminue dès l’induction de la différenciation et iii) qu’une inhibition de la voie ne suffit pas à induire la différenciation adipocytaire (article III).

The existence of a mesenchymal precursor able to differentiate into adipocyte or osteoblast was highlighted in the rodent as in human. That is of major interest knowing that a deregulation of adipocyte differentiation leads to the appearance of syndromes such as obesity or lipodystrophies. The signalling pathway controlling osteoblastic differentiation being often involved in adipocyte differentiation, we have chosen genes known to modulate osteogenesis and evaluated their role in adipocyte differentiation. The first work consisted in the study of the transmembrane protein tyrosine phosphatise (PTP) Ptprv, implied in osteogenesis, during adipocyte differentiation. We showed that Ptprv is expressed in the stroma vascular fraction of adipose tissue and that its transcription decreases during adipocyte differentiation but that it is not necessary to adipogenesis (article I). In parallel with this study, we undertook the cloning of the human ortholog of Ptprv. We isolated a 4kb transcript by RT-PCR. In this study, we highlighted the only PTP whose function has been lost during the evolution process between mouse and human (article II). Lastly, we studied the Hedgehog signalling pathway, known to promote the formation of bone. The antiadipogenic effect of this pathway was already described. We showed that i) there is a basal activity in the preadipocytes ii) this activity decreases at the induction of differentiation and iii) an inhibition of the pathway is not sufficient to induce differentiation adipocytaire (article III).